Cascada de señales intracelulares genómicas y no genómicas en células de linfoma T murino inducidas por hormonas tiroideas (HT)

BARREIRO ARCOS ML; FARÍAS RN; KLECHA AJ; STERLE HA; GENARO AM; CREMASCHI GA

Buenos Aires

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008

Sociedad Argentina de Fisiología

Las HT ejercen acciones en el desarrollo, crecimiento y diferenciación celular mediante efectos genómicos y no genómicos. Se ha demostrado que regulan la respuesta inmune, pero se desconocen los mecanismos implicados. Previamente demostramos que las HT inducen la división de las células del linfoma T BW 5147 (BW) a través de la activación de PKC zeta. En este trabajo estudiamos la cascada de señales intracelulares involucrada. Comprobamos que bloqueantes selectivos de las esfingomielinasas ácidas y neutras, imipramina y GW 4869 respectivamente, inhibieron los efectos de las HT sobre la proliferación y la actividad de PKC zeta. Por otra parte las HT, vía PKC zeta, inducen la expresión proteica (cuantificada por western blot, WB) y genómica (por RT-PCR) de iNOS. En estos efectos está involucrada la activación de NFkB (determinado por EMSA). Tanto T3 como T4 acopladas a agarosa e impermeables a la membrana celular, indujeron la respuesta proliferativa, aunque sus efectos fueron significativamente menores que los obtenidos con HT libres. Las HT acopladas a agarosa indujeron una rápida traslocación y activación de PKC a la membrana celular (medida por fosforilación  de un sustrato específico), asimismo provocaron la degradación en citoplasma del IkB con la consecuente traslocación de NFkB al núcleo (cuantificados por WB y EMSA, respectivamente). El pretratamiento de las células BW con el pseudosustrato de PKC zeta inhibió estos efectos, así como también la inducción de la proliferación mediada por HT-agarosa. Ambas, HT y HT-agarosa incrementaron la fosforilación de ERK (evaluado por WB) respecto de las células BW sin tratamiento hormonal. A diferencia de las HT, las HT-agarosa fueron incapaces de inducir la expresión proteica y genómica de iNOS. Estos resultados indican que la acción de las HT sobre las células BW involucra la activación no genómica de PKC, NFkB y ERK, llevan a la inducción genómica de la iNOS e incrementan así la proliferación celular.