Diseño de estrategias para la identificación de Ilex paraguariensis e Ilex dumosa mediante metodos moleculares

GIORGIO EM, MM TISCORNIA, PD ZAPATA.

Pergamino, Argentina

Congreso; XXXVI Congreso Argentino de Genética. Pergamino 2007.; 2007

Sociedad Argentina de Genética

El género Ilex (Aquifoliaceae) consiste en aproximadamente 400 especies diferentes vegetales que crecen como árboles o arbustos en climas relativamente húmedos, subtropicales, con una amplia distribución mundial. Las regiones de mayor producción son Brasil, Paraguay, Argentina y Uruguay. En estos países se utiliza Ilex paraguariensis para la preparación de una infusión conocida como “mate”. Sin embargo existen evidencias que indican que las infusiones de Ilex dumosa podrían ofrecer algunas ventajas respecto a las de Ilex paraguarensis, principalmente un bajo o nulo contenido en cafeína y xantinas, las que serían desde el punto de vista industrial potencialmente convenientes que se logren diferenciar. Por lo tanto es de importancia desarrollar métodos moleculares para la diferenciación entre ambas especies. En este trabajo se presenta el estudio bioinformático de la región ITS pertenecientes a seis especies distintas de Ilex realizado con el fin de determinar el grado de homología entre las secuencias y definir regiones útiles para el diseño de cebadores o sondas. Por otro lado se estandarizo la metodología para la extracción de DNA a partir de hoja elaborada. La extracción de ADN se realizó por maceración en nitrógeno líquido y digestión con proteinasa K, CTAB, β-mercaptoetanol y PVP en tampón Tris-HCL pH 8, EDTA y NaCl. Se purificó con cloroformo:isoamílico y acetato de potasio, se precipitó con isopropanol, se lavó con etanol 70% y se resuspendiendo en agua estéril. Para alcanzar una mayor purificación los genomas fueron reprecipitados con acetato de sodio e isopropanol.