Evaluación de una vacuna subcelular contra la brucelosis ovina constituida por la quimera BLSOmp31 formulada en un cristal líquido (Coagel) adicionado con secuencias CpG-ODN en el modelo murino

MORAN, MARÍA CELESTE; DÍAZ, ALEJANDRA GRACIELA; MARÍA FERNANDA SÁNCHEZ VALLECILLO; VANESA ZYLBERMAN; FERNANDO GOLDBAUM; BELKYS MALETTO; SANTIAGO PALMA; SILVIA MARCELA ESTEIN

Mar del Plata

Congreso; IV CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGÍA AGRÍCOLA Y AMBIENTAL (IV CAMAyA) y la I JORNADA DE MICROBIOLOGÍA GENERAL (I MICROGEN); 2018

Asociación Argentina de Microbiología

Brucella ovis es el agente causal de la epididimitiscontagiosa del carnero (ECC), enfermedad que ocasiona pérdidas económicassignificativas en la producción ovina. La ECC se controla a través de laeliminación de los animales serológica o bacteriológicamente positivos. No hayvacuna específica para prevenir la ECC. La inmunización con una quimeraconstituida por la Brucella LumazinaSintetasa y un péptido de la proteína de membrana Omp31 (BLSOmp31) formulado enadyuvante de Freund Incompleto (AFI) ha demostrado ser una vacuna subcelularinmunogénica y eficaz contra B. ovis enratón y en ovino. BLSOmp31 formulada en un sistema nanoestructurado de cristal líquido (Coagel) indujo laproducción de anticuerpos en ovejas preñadas que fueron transferidos a suscrías. El objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta inmunitaria humoraly la protección conferida por BLSOmp31 formulada con Coagel+CpG-ODN.Veinticinco ratones Balb/c hembras de 8 semanas se distribuyeron en 5 grupos(G) (n=5/G): G1) BLSOmp31 en solución, G2) BLSOmp31+CpG-ODN, G3)BLSOmp31+CpG-ODN+Coagel, G4) BLSOmp31+AFI y G5) PBS. Se inmunizaron por la víasubcutánea el día 0 y el día 30 con BLSOmp31 (30mg/dosis) y CpG-ODN (30mg/dosis). Los días 0, 21y 50 se extrajo sangre para suero para análisis de IgG por ELISA y el día 65 seinoculó vía intraperitoneal con 2,9 x 105 unidades formadoras decolonia (UFC) de B. ovis PA76250. Eldía 95 fueron sacrificados y los bazos fueron procesados bacteriológicamentepara recuento de UFC. La protección se evaluó como la reducción en unidadeslogarítmicas de las UFC con respecto al grupo control PBS. Los títulos deanticuerpos IgG en los animales inmunizados alcanzaron niveles significativosen todos los grupos tras la primera inmunización y máximos al momento deldesafío con un perfil mixto IgG2a/IgG1 en los grupos inmunizados con CpG-ODN.BLSOmp31 en solución o formulada con CpG-ODN confirió protección significativacontra B. ovis (1,12 y 1,2 log deprotección, respectivamente) (p<0,01). Sin embargo, los mayores niveles deprotección se obtuvieron con BLSOmp31+CpG-ODN+Coagel que protegió de modosimilar a BLSOmp31+AFI (2,13 y 2,21 log de protección, respectivamente)(p<0,001). Nuestros resultados preliminares indican que BLSOmp31 formuladacon Coagel+CpG-ODN y administrada por la vía parenteral es una vacuna segura yeficaz contra B. ovis en el modelomurino.