Diseño y caracterización de nanosistemas tópicos para terapia fotodinámica

DANIELA MAZA VEGA; CRISTIAN LILLO; MARÍA CECILIA IZQUIERDO; PAULA BUCCI; SILVIA DEL VALLE ALONSO; FERNANDO ALVIRA; JORGE MONTANARI

Rosario

Congreso; V Reunión GRAFOB 2020 (Grupo Argentino de Fotobiología); 2020

Grupo Argentino de Fotobiología

En este trabajo, se muestran resultados de la caracterización de puntos cuánticos de carbono (CQDs) que hemos sintetizado para ser empleados como efectores de terapia fotodinámica en el tratamiento de Leishmaniasis Cutánea. Así mismo, se caracterizaron a los nanotransportadores en los que preveemos encapsular los CQDs, etosomas ultradeformables.Por un lado, se prepararon distintas formulaciones etosomales basadas en fosfolípidos resuspendidos en medio acuoso, en presencia de una cantidad baja de etanol, con o sin agregado de surfactante. Los etosomas fueron a su vez cargados con dos sondas fluorescentes: una lipofílica como marca de la membrana y una hidrofílica como marca de su interior acuoso. Las formulaciones fueron caracterizadas respecto de su distribución de tamaño, polidispersión, potencial Z, deformabilidad, y fueron observadas por microscopía electrónica de transmisión (TEM). Los etosomas fueron incubados sobre explantos de piel humana donde se estudió su penetración a través del estrato córneo por el método de tape stripping, por microscopía confocal de fluorescencia de cortes transversales y por seccionamiento óptico. Por otro lado, se sintetizaron los CQDs mediante dos técnicas top-down[1,2] con yerba mate, té verde y espinaca como material de partida. Los productos obtenidos fueron caracterizados fisicoquímicamente por absorbancia y fluorescencia, se realizó la determinación de tamaño por Dynamic Light Scattering (DLS) y se midió consumo de oxígeno de una de las formulaciones, alentando una posterior medición de rendimiento cuántico de ROS.Con respecto a la nanopartícula de delivery, se encontró que la formulación etosomal conteniendo el surfactante Tween 80 (Et-Tw80) fue la más conveniente al tener en cuenta todos los factores evaluados. La formulación fue monodispersa, de tamaño controlado, con buen pronóstico de estabilidad, alta deformabilidad, y permitió transportar sondas fluorescentes hasta capas profundas de la piel [3].En el caso la nanopartícula efectora, los rendimientos cuánticos de fluorescencia obtenidos fueron comparables a los de bibliografía. Dichos rendimientos variaron en función del batch, material de partida y método de purificación. El resultado de la determinación de tamaño hidrodinámico por DLS mostró alta polidispersión en las muestras, con posible formación de agregados. Sin embargo, a partir de este experimento, surgió la necesidad de realizar una medida independiente del índice de refracción (n) de las muestras, dado que en bibliografía no se registra una determinación de esta propiedad.A modo de conclusión, se determinó como nanopartícula de delivery a la formulación Et-Tw80 y se confirmó emisión de fluorescencia y consumo de oxígeno de los puntos cuánticos. Por lo tanto, se espera continuar con la caracterización de estas nanopartículas, así como encapsular estos puntos cuánticos en los etosomas, para poder evaluar su capacidad para formar bioimágenes y ser empleados en terapia fotodinámica.