Ivermectina induce muerte celular programada en G.lamblia

BARZOLA F. N.; ROPOLO A S; TOUZ M.C.; FELIZIANI C.

Rio Cuarto

Jornada; XXV Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2022

Giardia lamblia es un protozoario parásito unicelular que causa una infección conocida como giardiasis, que puede ser asintomática o provocar una enfermedad aguda y enalgunos casos crónica. La evidencia actual sugiere que la adaptación de este parásito representa un ejemplo extremo de evolución reductiva sin pérdida de función. Estacaracterística única de G. lamblia, sumada al hecho de que su genoma se encuentra completamente secuenciado y que todo su ciclo de vida puede ser reproducido in vitro, laconvierte en un modelo ideal para estudiar diferentes mecanismos celulares, entre ellos, la muerte celular programada (MCP). Recientemente, en nuestro laboratorio,utilizamos ivermectina (IVM), un antiparasitario aprobado para nematodos, y observamos que tenía un efecto letal sobre los trofozoítos de Giardia a altas concentraciones.Debido a la escasa evidencia acerca de la existencia de un mecanismo clásico de MCP en este parásito amitocondriado, decidimos estudiarlo utilizando como herramientaIVM. Así, tratamos a los trofozoítos de G. lamblia con una concentración de IVM de 60 y 80 µM con una incubación de 12 hs. A continuación, estas células se tiñeron conAnexina V (marcador de apoptosis temprana) y PI (ioduro de propidio; marcador de daño de la membrana, posiblemente apoptosis / necrosis tardía) y se chequeó lafluorescencia. Nuestros resultados sugieren que IVM podría inducir un mecanismo de apoptosis temprana a dosis no letales, determinado por la tinción con Anexina V y PI.Los efectos de la droga también se analizaron por citometría de flujo, evaluando los trofozoítos luego de 12 hs de incubación con IVM 60 u 80 µM. Encontramos que eltratamiento con IVM 60 µM indujo la muerte por apoptosis tardía/necrosis (Anexina-V+ Ioduro de Propidio+) de alrededor del 16% de los parásitos, mientras que la incubacióncon la droga a 80 µM lo incrementó al 60%. Además, el tratamiento con IVM 60 uM indujo la muerte por apoptosis temprana (Anexina-V+ Ioduro de Propidio-) de alrededor del20% de trofozoítos. Estos hallazgos sientan las bases que nos permitirán valorar el uso de IVM como una droga contra la giardiasis, considerando que los tratamientosactuales no son totalmente efectivos y que la mayoría de los pacientes tratados con IVM no tienen efectos secundarios relacionados a la droga.