DETECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE PCV2 EN CERDOS SALVAJES DE LA BAHÍA DE SAMBOROMBÓN

WILLIMAN M; NEGRELLI PILAR M; CARPINETTI B; COLINA S; CAPPUCCIO J; NOGUEIRAS J; METZ GE; ECHEVERRÍA MG; SERENA MS

Córdoba

Jornada; XX1 Jornadas de Actualización Porcina; 2022

INTRODUCCIÓNDurante los últimos años, las poblaciones de cerdos silvestres han experimentado un importante aumento en Argentina, frecuentemente superpuestas con la distribución de granjas comerciales en las zonas de mayor producción porcina (Córdoba, Buenos Aires, La Pampa y Entre Ríos). La reserva natural Bahía de Samborombón se encuentra íntimamente relacionada en función a su localización geográfica con distintas granjas de la provincia de Bs.As y la invasión del jabalí es un problema importante. Por esa razón el Organismo Provincial para el Desarrollo Sostenible lleva a cabo un plan de control con el objetivo de reducir la población de cerdos salvajes (http://www.opds.gba.gov.ar). Sin importar el origen, existe consenso sobre el impacto negativo ambiental, tanto afectando a la flora y la fauna local, como a la producción agropecuaria, en todas las áreas donde se encuentran poblaciones de Sus scrofa ya sea como jabalí o como cerdo asilvestrado. Asimismo, actúa de reservorio de enfermedades potencialmente transmisibles al cerdo doméstico y a otras especies entre las que se encuentra el Circovirus porcino tipo 2 (PCV2), responsable de importantes pérdidas en la industria porcina a nivel mundial. El PCV2 pertenece a la familia Circoviridae, es un virus pequeño no envuelto, con un genoma circular monocatenario de 1767-1768 pb con cuatro marcos abiertos de lectura (ORFs) (1). El ORF2 codifica para la proteína estructural de la cápside (cap), y se describe como un marcador filogenético y epidemiológico para el estudio de dicho virus. Al momento, se conocen nueve genotipos diferentes denominados con letras de la a, a la i. En Argentina, nuestro grupo de trabajo ha realizado estudios de caracterización molecular en cerdos domésticos, demostrando la circulación de más de un genotipo (2; 3). El objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de PCV2 en la población de cerdos salvajes que habitan la reserva natural Bahía de Samborombón de la provincia de Buenos Aires. MATERIALES Y MÉTODOSDesde 2018 hasta la actualidad, se capturaron 111 animales, luego de la obtención de los permisos de captura científica correspondientes. Se tomaron muestras de órganos de cada ejemplar (corazón, pulmón, riñón, bazo e hígado) las cuales fueron conservadas a 4°C hasta su remisión al Laboratorio de Virología-CEMIBA, FCV-UNLP. Las muestras se procesaron en forma estéril formando “pooles” por animal para la extracción del material genético con kit comercial High Pure PCR Template Preparation Kit, Roche. Se realizó la técnica de PCR para la detección del gen cap utilizando como cebadores: CapF 5’-CTTTTTTATCACTTCGTAATG-3’ y CapAR 5’-ACCCTTTGAATACTACAGA-3’. Los productos de PCR fueron visualizados tras una corrida electroforética en gel de agarosa y teñido con bromuro de etidio. Posteriormente, los fragmentos obtenidos fueron purificados y secuenciados en la Unidad Genómica INTA, Castelar. Las secuencias obtenidas fueron analizadas mediante NCBI BLAST y el programa MEGA7.0 fue utilizado para el estudio de variabilidad genética realizado con secuencias disponibles en el Genbank.RESULTADOSDel total de muestras analizadas (n=111), 26 resultaron positivas por PCR evidenciando un fragmento de aprox. 460 pb. Luego de la purificación y secuenciación se lograron obtener hasta el momento 4 secuencias correspondientes al muestreo del año 2018; mientras se esperan resultados de 9 muestras enviadas a secuenciar colectadas en el transcurso de este año. Todas las secuencias obtenidas mostraron un alto porcentaje de similitud entre sí y con la cepa de origen chino MH01 (100%). Asimismo, el análisis filogenético reveló que todas las secuencias de este trabajo formaron un grupo separado junto con otras secuencias de cerdos salvajes obtenidas en Italia, clasificadas como genotipo d por Del Guidici B. y col. 2019 (4). DISCUSIÓNEl PCV2 es considerado un patógeno emergente y la vacunación masiva a partir del año 2005 ha controlado los cuadros clínicos localizados o sistémicos, no así la infección, en la población porcina. Diversos estudios en distintos países reportan la presencia y caracterización de varios genotipos en poblaciones de cerdos salvajes. Las cepas argentinas reportadas previamente se clasifican como genotipo b, aquellas obtenidas antes del 2010, y como genotipo d aquellas detectadas en los años 2014, 2016 y 2021. Según los resultados de este trabajo las secuencias obtenidas a partir de cerdos salvajes se encuentran agrupadas con aquellas cepas pertenecientes al mismo genotipo detectado en los últimos años (genotipo d). Este trabajo es el primer reporte sobre la caracterización molecular de PCV2 en cerdos silvestres en Argentina y los resultados obtenidos demuestran la estrecha relación entre cepas de cerdos domésticos y salvajes. Es necesario continuar con el análisis y caracterización de nuevas cepas en este tipo de poblaciones para conocer, actualizar los genotipos actuantes, como así también inferir un posible origen filogenético.