Desarrollo de un antígeno recombinante NS1 del virus de la lengua azul para la detección serológica de la infección en Argentina

MORTOLA E; SERENA M. S.; LARSEN A; DUS SANTOS MJ; ECHEVERRÍA MG

Tandil

Jornada; XIV Jornadas de Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria y II Reunión de la Red Latinoamericana de Inmunología Veterinaria.; 2022

La lengua azul es una enfermedad viral de los pequeños rumiantes transmitida por insectos (Culicoides). El agente causal es un virus de la familia Reoviridae y del género Orbivirus. Las proteínas no estructurales de los virus han sido el objetivo ideal, no solo para el diagnóstico serológico de una enfermedad, sino también para diferenciar los animales infectados de los vacunados. La proteína no estructural 1 (NS1) de 64 kDa, actúa como un regulador positivo de la síntesis de proteínas virales, es la más abundante expresada en el citoplasma de las células infectadas por el virus y es la única responsable de la formación de túbulos helicoidales dinámicos característicos, fácilmente purificables y muy estables. Además, esta proteína está altamente conservada entre los diferentes serotipos del virus. Si bien nuestro país es libre del VLA en la mayor parte de su superficie, ha habido reportes de serología positiva y detección del virus en el NEA por más de 20 años. Por otro lado, existe riesgo de expansión de los límites actuales de circulación viral debido a las condiciones dinámicas cambiantes, asociadas al cambio climático. En este contexto, y dado que NS1 es la principal proteína viral sintetizada en células infectadas con el virus de la lengua azul, el objetivo de este trabajo fue producir la proteína recombinante NS1 en el sistema de baculovirus-células de insecto y evaluarla como antígeno en pruebas inmunoserológicas. Empleando células de insectos sf9, se obtuvo una producción muy eficiente de la proteína NS1, que fue purificada por gradientes de sucrosa y su antigenicidad comprobada por la técnica de Western blot, empleando sueros control positivos y negativos. Los resultados obtenidos permiten iniciar el desarrollo de pruebas inmunoserológicas específicas, económicas y de fabricación local, destinadas a implementar un sistema de diagnóstico que permita incrementar el control serológico de la circulación viral en nuestro país