DIAGNÓSTICO DE SARCOCYSTIS SPP. EN CERDOS DE ARGENTINA

HELMAN, E.; DELLARUPE, A.; MORÉ, G.

Río Cuarto

Jornada; XXI JORNADAS DE ACTUALIZACIÓN PORCINA 2022; 2022

Universidad Nacional de Río Cuarto

INTRODUCCIÓNLa sarcocystosis es una infección parasitaria producida por una o más de las especies del género Sarcocystis. Presentan ciclos indirectos, con producción de quistes musculares por reproducción asexual en sus hospedadores intermediarios (HI) y de ooquistes con esporocistos por reproducción sexual en el intestino de sus hospedadores definitivos (HD). Se conocen 2 especies que afectan a los suinos como HI: S. miescheriana y S. suihominis, cuyos HDs son los cánidos y los humanos, respectivamente (1). La identificación y diferenciación de las especies del género se realiza tanto por estudios de microscopía (basados en el tamaño, grosor y estructura de la pared de los quistes), como por estudios moleculares (PCR-Secuenciación). Las tasas de infección reportadas a nivel mundial en suinos son muy variables y la prevalencia en Argentina es desconocida (2, 3, 4). Los objetivos de este trabajo fueron identificar las especies de Sarcocystis en músculos de cerdos de cría intensiva y extensiva, por métodos de microscopía y estudios moleculares, y determinar la tasa de infección en la población estudiada. MATERIALES Y MÉTODOSSe analizaron músculos de 561 cerdos, los cuales se clasificaron según el tipo de cría en: intensiva [CI, n=295], considerada para animales mantenidos en confinamiento durante la mayor parte de su ciclo reproductivo, o semiextensiva [CSE, n=266], para animales de producción familiar y/o de traspatio. Las muestras se analizaron por observación microscópica, en busca de quistes de Sarcocystis spp. Para ello, se homogeneizaron 5-10 g de músculo de cada animal con 50 ml de buffer de fosfato (PBS) (5). Se consideraron positivas aquellas muestras donde se observó una fracción y/o un quiste completo de Sarcocystis spp. Se guardaron quistes de 10 muestras y se fijaron en glutaraldehído al 2% para estudios de microscopía electrónica de transmisión (MET). Se colectaron quistes individualizados de 14 muestras positivas a la microscopia, y alícuotas de homogenatos de 202 muestras seleccionadas al azar (CI, n=104 y CSE, n=98) en microtubos DNAsa free para extracción de ADN. Posteriormente, se llevó a cabo una PCR para el fragmento del gen 18S rRNA para Sarcocystis spp. como fue descripto previamente (5). A las muestras que resultaron positivas, se les realizó una PCR para el gen de la citocromo c oxidasa I (coxI), para la identificación de S. suihominis (4). Además, se purificaron los amplificados de 14 quistes positivos a la PCR del fragmento 18S rRNA y se los envió para secuenciar en ambos sentidos a Macrogen, Argentina. Las secuencias se alinearon con el software GENEIOUS (versión R9) y fueron analizadas y comparadas mediante BLAST (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi). RESULTADOSEl 32,9% (139/561) de las muestras analizadas por observación microscópica resultaron positivas para la presencia de quistes de Sarcocystis spp. De éstos, el 34,6% (92/266) de los cerdos de CSE resultaron positivos al análisis microscópico, siendo significativamente mayor al 15,9% (47/295) obtenido en los de CI (p