ESTUDIO DE MUTACIÓN BRAF Y REORDENAMIENTO NTRK INTEGRADO AL DIAGNÓSTICO DE CARCINOMA PAPILAR DE TIROIDES PEDIÁTRICO

COLLI S; DE MATTEO E; MEDIN M; GRANDIS E, ; PAPENDIEK P,; CHIESA A; CARDOSO N, ; MANGONE F; ROZAS D; LORENZETTI M; M V PRECIADO

Congreso; 49 Congreso Argentino de Patologia; 2022

Sociedad Argentina de Patología

INTRODUCCIÓN: El cáncer de tiroides es la neoplasia maligna endocrina más común en pediatría y su incidencia está aumentando mundialmente. Es el segundo cáncer más común en adolescentes en Estados Unidos. El carcinoma papilar de tiroides (CPT) representan el 90 % de los carcinomas de tiroides pediátricos y difiere clínica, patológica y genéticamente de los CPT de adultos. Los CPT pediátricos suelen estar más avanzados al diagnóstico con mayor tamaño tumoral y mayor tasa de metástasis en ganglios linfáticos y a distancia. Sin embargo, el pronóstico es excelente y la mortalidad es muy baja. Estas diferencias podrían relacionarse con la genética molecular subyacente. El CPT pediátrico tiene una frecuencia significativamente menor de mutación BRAFV600E, rara vez porta otras mutaciones puntuales y es más probable que tenga proteínas de fusión. OBJETIVO: Identificar alteraciones genéticas (fusiones NTRK, RET y mutación BRAFV600E) comparando resultados Inmunohistoquímicos con técnicas moleculares y correlacionar los hallazgos con las características clínico-patológicas de CPT de nuestra población pediátrica.MATERIALES Y MÉTODOS: revisión retrospectiva (2012-2022) de características clínico-patológicas y estudio genético de muestras fijadas en formol y embebidas en parafina (MFFEP) de pacientes diagnosticados con CPT y tratados en el HNRG.Sistema de estadificación AJCC TNM 8°edición y Sistema de estadificación de riesgo de Asociación tiroidea americana (ATA) 2015.Tinción inmunohistoquímica para anticuerpo anti-pan-TRK(clon EPR17341 Ventana/Roche), anticuerpo anti-Braf(clon VE1 Ventana/Roche), en equipo automatizado Ventana Ultra XT.Hibridación in situ fluorescente (FISH) con sondas Break apart para NTRK1, NTRK2, NTRK3 y RET. Secuenciación Sanger para mutación BRAFV600E.RESULTADOS: La cohorte consistió en 53 pacientes(p) pediátricos con CPT, la edad media al diagnóstico fue de 12,9 años, rango de edad 7-17 años, relación mujer:varón 3:1. 3 p realizaron radioterapia previa al diagnóstico; 2 por tumor neuroblástico y 1 por leucemia linfocítica aguda (LLA), este último p desarrolló melanoma y CPT sincrónicos 4 años después. Otros 2 p se presentaron con tumor sincrónico al CPT (1 con meduloblastoma y 1 con tumor de Frantz). Las variantes histológicas de CPT fueron: 23 clásica, 9 folicular infiltrante, 3 folicular encapsulada, 5 esclerosante difuso, 9 microcarcinoma,1 oncocítica, 1 pobremente diferenciado y 1 sólido infiltrante. El tamaño medio del tumor fue 2,2 cm; se observó multifocalidad en 28(52,8%); invasión extratiroidea en 16(30,1%); angioinvación en 31(58,4%); metástasis a ganglio linfático en 36(67,9%) y metástasis a distancia en 10(18,8). De acuerdo a la estratificación inicial según ATA 2015: 7(13,2%) p correspondieron a riesgo bajo, 18(33,9%) intermedio y 28(52,8%) alto. En relación a las alteraciones genéticas estudiadas encontramos: 6 con expresión IHQ de BRAFV600E, 5 con mutación confirmada por Sanger; todos con variante clásica, en cuanto al riesgo: 3/5 alto, 2/5 intermedio. 5 p con expresión de Pan-trk con los siguientes patrones de tinción: citoplasmático fuerte y difuso: 2/5, citoplasmática focal y débil: 1/5, citoplasmático débil y nuclear focal: 1/5 y de membrana: 1/5. Todos los p con expresión de Pan-Trk portaron reordenamiento de NTRK3 y sus variantes histológicas fueron: 3/5 folicular infiltrante, 1/5 clásica y 1/5 pobremente diferenciado; los riesgos fueron: 3/5 alto y 2/5 bajo; 2/5 con metástasis a distancia. 1 p con reordenamiento de RET, variante folicular infiltrante y alto riesgo.CONCLUSIÓN: El porcentaje de detección de gen de fusión fue del 11,3%, similar a lo reportado en otras series.De los 5 pacientes con fusión NTRK, 3 se asociaron con antecedentes de radioterapia previa, destacamos el hallazgo en 3 pacientes con tumor sincrónico (meduloblastoma, melanoma y tumor de Franzt respectivamente).Similar a lo reportado en la bibliografía la variante folicular infiltrante predominó (60%) entre los NTRK fusionados, la mayoría presentaron enfermedad de alto riesgo Si bien se observó una correlación del 100% entre la expresión por IHQ y la fusión NTRK3 por FISH, hallamos heterogeneidad en el patrón e intensidad de la tinción, por lo que el marcador Pan-trk exhibe alta especificidad pero debe interpretarse con precaución.El gen de fusión RET es el más frecuentemente involucrado en el CPT pediátrico, sin embargo hallamos un solo caso positivo entre nuestra serie.Coincidentemente con los reportes bibliográficos el porcentaje de casos con mutación BRAFV600E fue del 9,4%, muy por debajo a lo esperado en la población adulta.Si bien no hay una asociación concreta entre la variante histológica y la mutación BRAFV600E, coincidentemente todos los casos mutados presentaron la variante clásica del CPT.No se halló coexistencia de gen de fusión y mutación BRAF, constatando que ambas alteraciones son autoexcluyentes, dato que permite dirigir la selección de casos no mutados para estudio de pan-trk y reducir costos.En nuestros casos la IHQ pan-trk resultó una herramienta consistente para una selección inicial de tumores candidatos a eventual estudio molecular.Particularmente en los países en desarrollo donde el acceso a la secuenciación NGS aún es limitado, la evaluación de biomarcadores por medio de técnicas convencionales como IHQ, FISH y PCR es de suma importancia para lograr un marco de evaluación adaptado al riesgo y terapias dirigidas molecularmente que complementen, optimicen o reemplacen la terapia convencional.