Estandarización de un ELISA para detección de anticuerpos contra el virus de hepatitis E (VHE) en porcinos: resultados preliminares

GUTIERREZ S.E; ARCE L.; .BENCE A.R.; MATÍAS BRANCHER J.R.; RIVERO M.A.; MORAN M.C.; SANCHEZ F.; KUHN T.; CAFERRI J.; ARRIEN M.; FRANCESCHETTI P.; BRUSCO M.; ESTEIN S.M.; VIZOSO PINTO M.G.

Tandil

Jornada; XIV Jornadas Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria. II Reunión de la Red Latinoamericana de Inmunología Veterinaria.; 2022

AAIV

ESTANDARIZACIÓN DE UN ELISA PARA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS CONTRA EL VIRUS DE HEPATITIS E (VHE) EN PORCINOS: RESULTADOS PRELIMINARESSTANDARDIZATION OF AN ELISA FOR THE DETECTION OF ANTI- HEPATITIS E VIRUS ANTIBODIES IN SWINE : PRELIMINARY REPORTGutiérrez, S.E.1* ; Arce, L.P.2 ; Bence, A.R.1 ; Matias Brancher, J.R.2 ; Rivero, M.A.1 ; Moran, M.C.1 ; Sanchez, F.3 ; Kuhn, T.M.3 ; Caferri, J.3 ; Arrien, M.M.3 ; Franceschetti, P.3 ; Brusco, M.4 ; Estein, S.M.1 ; Vizoso Pinto, M.G.2.1. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil (CIVETAN), Buenos Aires, Argentina.2. Instituto Superior de Investigaciones Biológicas (INSIBIO) (CONICET-UNT), Universidad Nacional de Tucumán, Tucumán, Argentina.3. Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA, Tandil, Buenos Aires, Argentina.4. Departamento de Clínicas, Facultad de Ciencias Veterinarias, UNCPBA, Tandil, Buenos Aires, Argentina.* e-mail: segutier@vet.unicen.edu.arEl virus de la hepatitis E (VHE) es un patógeno emergente en humanos en países industrializados. El genotipo 3 del VHE, de distribución mundial y el más frecuentemente encontrado en América Latina, es de carácter zoonótico, siendo el cerdo doméstico y el cerdo asilvestrado los principales reservorios. El porcino no enferma pero transmite el VHE al hombre, quien adquiere la infección por exposición ocupacional, consumo de carne mal cocida, o por ingestión de agua contaminada con materia fecal de animales infectados. El objetivo del presente trabajo fue estandarizar un ELISA indirecto para detectar IgG anti-VHE en muestras de suero porcino, que nos permita estudiar la seroprevalencia y epidemiología de la infección. Se utilizó como antígeno un polipéptido de 66 kDa de la proteína de la cápside del VHE producido en forma recombinante, adsorbido a microplacas de poliestireno. Para la detección de los anticuerpos específicos se utilizó un anticuerpo anti-IgG porcina conjugado a peroxidasa y TMB/H2O2. Para definir las condiciones óptimas del ensayo utilizamos un panel de 54 muestras positivas y 70 negativas, analizadas mediante un ensayo de tercera generación: HEV Ab, Versión ULTRA (DIA.PRO, Italia). Se ensayaron distintas concentraciones de antígeno adsorbido, dilución del suero y del conjugado. En cada placa se incluyeron 3 controles positivos con diferente grado de reactividad y varios sueros negativos. Para cada muestra se determinó la relación de A450nm/promedio A450nm de controles negativos (A450nm muestra/CN) y se realizó un análisis ROC (receiver operating characteristic) utilizando Epitools, versión 1.0.9, 2022. El área bajo la curva resultó 0,985 (IC 95% 0,97-0,999). Para un valor de corte de 2,14 (A450nm muestra/CN) la sensibilidad y especificidad relativas a la técnica utilizada como referencia fueron 0,926 y 0,943, respectivamente. El ensayoes menos sensible que la prueba de referencia, no obstante, resulta apropiado para investigar la epidemiología de la infección.