La sobre-expresión prolongado de E6/E7 del VPH-16 en el canal anal produce cambios epiteliales displásicos en un modelo murino genéticamente modificado.

AYRE, MARINA; DI GAUDIO A.; GONZALO FERNANDEZ UGAZIO; COSO O A; ANA R RAIMONDI

Buenos Aires

Jornada; XXXV Jornadas Multidiscipliarias de Oncologia; 2022

Instituto de Oncologia Angel H Roffo, UBA

El carcinoma de células escamosas anal (CCEA) es una neoplasia maligna rara del tracto gastrointestinal inferior. Sin embargo, es uno de los tipos de cáncer más comúnmente reportado en pacientes VIH +. Habiéndose demostrado que la infección por el virus del papiloma humano (VPH) es el principal causante del desarrollo de CCEA. La infección por VPH está asociada en un 75% a 90% al CCEA. No se conocen exactamente los mecanismos moleculares involucrados en la patogénesis del CCEA. Previamente, hemos validado la línea murina K14CreERTAM que direcciona la recombinación mediada por Cre al epitelio del canal anal. Con el fin de estudiar el papel de las oncoproteínas E6 y E7 del VPH en la carcinogénesis anal desarrollamos un modelo murino transgénico específico para sobre-expresar E6/E7 del VPH-16 (K14CreERTAM/Rosa26-rtTA-IRES-EGFP-rtTAflox /Tet-E6/E7: Tg-E6/E7). Luego de dos meses de sobre-expresión de E6/E7 el epitelio anal desarrollo hiperplasia con hiperortoqueratosis, acantosis y aumento de la actividad proliferativa en las capas basales. En este trabajo nos propusimos evaluar el efecto de la prolongación de la sobre-expresión de E6/E7 así como caracterizar el tipo epitelial afectado. Inducción del sistema: tratamiento con tamoxifeno por vía oral (1mg/ ratón /día) 5 días, seguido de administración de doxiciclina (DOX, 2g/L) en el agua de bebida. Generamos animales Tg-E6/E7 y se dividieron en grupos según el tiempo de administración de DOX: 2 meses (grupo 1), 4 meses (grupo 2), 2 meses con y dos meses sin DOX (grupo 3). Animales con TAM sin DOX (grupo control). Total de animales 16. La evaluación histológica reveló un epitelio anal anormal en los grupos 1, 2 y 3. El grupo control no presento cambios histológicos relevantes. El grupo 1 y 3 presentaron hiperplasia y acantosis según lo descripto previamente. Mientras que en el grupo 4 se describieron cambios compatibles con displasia leve. Con el fin de caracterizar el perfil de citoqueratinas (CK) expresado por las lesiones descriptas se determinó por inmunohistoquímica CK14 (marcador de epitelio estratificado) y CK7 (marcador de la unión escamosa-columnar). Encontramos que tanto las zonas hiperplasias como las displásicas expresaron CK14 mientras que las lesiones fueron negativas para CK7. Concluimos que el modelo presentado incrementa la severidad de las lesiones desarrolladas en función del tiempo de sobre-expresión de E6/E7 y que esas lesiones se desarrollan en el epitelio estratificado del canal anal.