Perfil genético y fenotípico de cepas de Helicobacter pylori aisladas en San Luis-Argentina

MATTANA C.; ESCOBAR F.; VEGA A.; SABINI L.

Antofagasta

Congreso; XXV Congreso Chileno de Microbiologia Dr. Juan Noe; 2003

El genotipo Helicobacter pylori cagA+ y la expresión del producto del gen vacA, VacA, están asociados con una mayor virulencia bacteriana. En este trabajo se aislaron 204 muestras de ADN cromosomal de aislamientos locales caracterizados como H. pylori por métodos invasivos de referencia y confirmados genéticamente usando un oligonucleótido antígenoespecífico de especie. En estas cepas se detectó el gen cagA mediante PCR usando 2 pares de cebadores específicos. Para poner de manifiesto la expresión de VacA se sembraron 11 cepas locales y una cepa CCUG de H. pylori en 50 ml de caldo Mueller-Hinton suplementado con 5% de suero fetal bovino e incubado a 37ºC en microaerofilia durante 24 h. Los cultivos fueron centrifugados y concentrados por ultrafiltración. Diluciones adecuadas de los sobrenadantes de cultivos fueron sembradas en monocapa de células Vero e incubadas a 35 ºC hasta 36 h. las proteínas de los sobrenadantes fueron analizadas por SDS-PAGE. La prevalencia de la infección por H. pylori fue del 68% (204/300). La gastritis fue el diagnostico endoscópico mas observado. El gen cagA fue detectado en solo 30 aislamientos genómicos (15%). Los ensayos de citotoxicidad en células Vero permitieron diferenciar claramente 7 cepas fenotípicamente Tox+ (vacuolizantes). El rango de los títulos de toxina varió entre 5 y 40, indicando una moderada capacidad de expresión in vitro. La cepa CCUG no mostró actividad vacuolar. La baja frecuencia de alteraciones digestivas más severas como úlceras y cáncer, conjuntamente con el bajo índice de detección del gen cagA y la moderada actividad citotóxica sugiere una prevalencia de cepas de menor potencial patogénico.