INVESTIGADORES
KEUNCHKARIAN Sonia
congresos y reuniones científicas
Título:
ESTUDIO DE LAS VARIABLES CROMATOGRÁFICAS QUE INCIDEN EN LA ENANTIOSEPARACIÓN POR HPLC DE AMINOÁCIDOS N-PROTEGIDOS.
Autor/es:
SONIA KEUNCHKARIAN, JUAN M. PADRÓ, CECILIA B. CASTELLS
Lugar:
Bs. As. (Argentina)
Reunión:
Congreso; XXVIII Congreso Argentino de Química y 4to. Workshop de Química Medicinal "Bicentenario de Mayo"; 2010
Institución organizadora:
Comité Organizador
Resumen:
ESTUDIO
DE LAS VARIABLES CROMATOGRÁFICAS QUE INCIDEN EN LA ENANTIOSEPARACIÓN POR HPLC DE AMINOÁCIDOS
N-PROTEGIDOS.
Sonia
Keunchkarian, Juan M. Padró, Cecilia B. Castells
Laboratorio de Separaciones Analíticas. Departamento de Química. Facultad
de Ciencias Exactas. Universidad Nacional de La Plata. 47 y 115.
sonja@quimica.unlp.edu.ar
Introducción. Numerosas sustancias
químicas de interés en diversas áreas son ópticamente activas. En la separación
de estos enantiómeros se emplea usualmente técnicas cromatográficas con fases
estacionarias quirales (FEQs) tanto en cromatografía líquida como en gaseosa.
El objetivo del presente
trabajo fue la resolución de los isómeros ópticos de aminoácidos naturales
derivatizados con un cromóforo mediante HPLC sobre una FEQ basada en el
alcaloide natural quinina y el estudio de las variables cromatográficas que
afectan la retención y enantioselectividad en este sistema.
Resultados y discusión. Algunos de los resultados obtenidos en el estudio sistemático de las
variables cromatográficas se muestran a continuación.
1)
Efecto de la temperatura
Figura
1. Gráficos de vant Hoff para cinco dinitrofenilderivados de aminoácidos
(DNP-aas) a pH=6,24 (arriba). Dependencia de la enantioselectividad con 1/T
(abajo).
2) Efecto de la fuerza iónica
Tabla 1. Factores de retención y de enantioselectividad
para DNP-aas con fases móviles de distinta fuerza iónica a pH= 6,03 y a 40°C.
pH=6,03
0,05M
0,10M
0,15M
DNP-aa
20°C
40°C
20°C
40°C
40°C
k1
k2
α
k1
k2
α
k1
k2
α
k1
k2
α
k1
k2
α
Pro
40,12
50,91
1,27
24,26
29,73
1,23
26,23
33,18
1,27
16,25
19,88
1,22
9,97
12,14
1,22
Ser
38,40
49,88
1,30
21,77
26,63
1,22
25,40
32,92
1,30
14,72
17,99
1,22
8,98
10,94
1,22
Ala
42,63
55,22
1,30
24,97
30,95
1,24
27,91
36,04
1,29
16,64
20,58
1,24
10,51
12,94
1,23
Met
--
--
--
34,40
40,06
1,16
--
--
--
25,50
29,80
1,17
16,09
18,76
1,17
Arg
3,29
3,78
1,15
1,97
2,25
1,14
3,20
3,67
1,15
1,90
2,16
1,14
1,75
2,06
1,18
3)
Efecto del
modificador orgánico
Tabla 2. Factores de retención, de enantioselectividad y de asimetría para
DNP-aas con fases móviles isoeluotrópicas formadas por metanol o acetonitrilo a pH= 5,50.
DNP-aa
MeOH
20% buffer 100mM
pH=5,50
ACN
30% buffer 100 mM
pH = 5,50
k1