ENANTIOSEPARACIÓN MEDIANTE HPLC DE AMINOÁCIDOS N-PROTEGIDOS SOBRE UNA FASE ESTACIONARIA QUIRAL CONSTITUIDA POR UN INTERCAMBIADOR ANIÓNICO BASADO EN QUININA.

S. KEUNCHKARIAN; J.M. PADRÓ; C.B. CASTELLS

San Miguel de Tucumán (Argentina)

Congreso; XXVII Congreso Argentino de Química; 2008

Comité Organizador

Un gran número de sustancias químicas de interés en diversas áreas (industrias farmacéutica, agroquímica, petroquímica y alimenticia, así como en síntesis y biología) son ópticamente activas. La experiencia acumulada en las últimas décadas ha demostrado que mientras uno de los enantiómeros es el responsable de la actividad de interés, el otro puede ser: inocuo, tener la misma o alguna otra propiedad biológica o incluso tener efectos indeseables. La separación de estos enantiómeros requiere de estrategias analíticas que involucren reacciones químicas con reactivos ópticamente puros para formar diastereómeros o bien de sistemas separativos capaces de formar complejos transientes con ambos enantiómeros del racemato con diferente constante de asociación. Muchos de los métodos de separación quiral más eficientes están basados en técnicas cromatográficas. Entre ellos la introducción de fases estacionarias quirales (FEQs) en cromatografía, tanto líquida como gaseosa, es ventajosa por ser directa, no requerir reactivos adicionales ni la inversión de la reacción de derivatización y/o formación del compuesto diastereómero luego de la separación. Si bien el número de FEQs desarrolladas hasta el momento es importante, permanentemente se están buscando sustancias quirales capaces de mejorar las propiedades cromatográficas de las  ya existentes: enantioselectividad, eficiencia y generalidad de aplicación. El objetivo del presente trabajo es la resolución de los isómeros ópticos de aminoácidos naturales, previamente derivatizados con un cromóforo (reactivo de Sanger: 2,4-dinitrofluorbenceno) mediante HPLC con detección UV. Para ello se sintetizó en nuestro laboratorio una FEQ tipo “Pirkle” fijando un selector quiral, el alcaloide natural quinina, a un soporte silíceo modificado. La síntesis se realizó en dos etapas: la primera consistió en obtener un derivado reactivo de la sílice (mercaptopropilsílice) que luego se hizo reaccionar por adición al doble enlace del alcaloide. Se realizaron varias reacciones de síntesis cambiando el material de partida (sílice de diferente área superficial) y las condiciones operacionales hasta obtener un material con un cubrimiento de selector quiral satisfactorio. Se estudió cromatográficamente la FEQ así obtenida empacando una columna de cromatografía líquida a alta presión y evaluando su capacidad de enantioreconocimiento y las variables cromatográficas que afectan la retención y selectividad: naturaleza y porcentaje de solvente orgánico, pH de la fase móvil y temperatura. Los resultados obtenidos fueron alentadores, pues se pudo optimizar la separación de estos analitos en cuanto a selectividad, resolución y tiempo de análisis.