Efecto del solvente de muestra sobre la forma de los picos cromatográficos de analitos eluidos bajo condiciones de RPLC

S. KEUNCHKARIAN, M. R. RETA Y C. B. CASTELLS

San Luis (Argentina)

Congreso; III Congreso Argentino de Química Analítica; 2005

Comité Organizador

Las anomalías en la forma de los picos cromatográficos constituyen uno de los problemas más comunes en cromatografía líquida. Generalmente, el cromatografista acepta picos no gaussianos, siempre que la deformación no sea excesiva, aún cuando éstos sean causantes de problemas de integración y pérdidas en la resolución entre picos. Cuando el solvente de la muestra o de los estándares y el de la fase móvil no es el mismo es posible obtener picos distorsionados. En realidad, es bien sabido que la muestra a inyectar debería ser disuelta en la fase móvil. Sin embargo, el pre-tratamiento de la misma frecuentemente finaliza con los analitos disueltos en una composición de solventes diferente de la del eluyente. La regla básica difundida entre los cromatografistas es no usar un solvente de muestra más fuerte que el empleado como eluyente, pero se ignora que el origen de las deformaciones (consistentes en este caso en el ensanchamiento de los picos), es debido a la diferencia de viscosidad entre el solvente usado en la disolución de la muestra y el usado como fase móvil. Este efecto es aún más notorio para las bandas poco retenidas. El objetivo del presente trabajo es evaluar críticamente el rol del solvente de muestra en la distorsión de las bandas cromatográficas, con énfasis en los análisis por HPLC “rápidos”. También se discuten soluciones prácticas para situaciones donde el análisis cromatográfico se desarrolla en condiciones alejadas de la idealidad, resultantes de contratiempos relacionados con la preparación de la muestra.