ESTUDIO DE LAS VARIABLES CROMATOGRÁFICAS QUE INCIDEN EN LA ENANTIOSEPARACIÓN POR HPLC DE AMINOÁCIDOS N-PROTEGIDOS.

SONIA KEUNCHKARIAN, JUAN M. PADRÓ, CECILIA B. CASTELLS

Bs. As. (Argentina)

Congreso; XXVIII Congreso Argentino de Química y 4to. Workshop de Química Medicinal "Bicentenario de Mayo"; 2010

Comité Organizador

ESTUDIO DE LAS VARIABLES CROMATOGRÁFICAS QUE INCIDEN EN LA ENANTIOSEPARACIÓN POR HPLC DE AMINOÁCIDOS N-PROTEGIDOS.   Sonia Keunchkarian, Juan M. Padró, Cecilia B. Castells Laboratorio de Separaciones Analíticas. Departamento de Química. Facultad de Ciencias Exactas. Universidad Nacional de La Plata. 47 y 115. sonja@quimica.unlp.edu.ar     Introducción. Numerosas sustancias químicas de interés en diversas áreas son ópticamente activas. En la separación de estos enantiómeros se emplea usualmente técnicas cromatográficas con fases estacionarias quirales (FEQs) tanto en cromatografía líquida como en gaseosa. El objetivo del presente trabajo fue la resolución de los isómeros ópticos de aminoácidos naturales derivatizados con un cromóforo mediante HPLC sobre una FEQ basada en el alcaloide natural quinina y el estudio de las variables cromatográficas que afectan la retención y enantioselectividad en este sistema.   Resultados y discusión. Algunos de los resultados obtenidos en el estudio sistemático de las variables cromatográficas se muestran a continuación.   1)      Efecto de la temperatura Figura 1. Gráficos de van’t Hoff para cinco dinitrofenilderivados de aminoácidos (DNP-aas) a pH=6,24 (arriba). Dependencia de la enantioselectividad con 1/T (abajo).   2)      Efecto de la fuerza iónica   Tabla 1. Factores de retención y de enantioselectividad para DNP-aas con fases móviles de distinta fuerza iónica a pH= 6,03 y a 40°C. pH=6,03 0,05M 0,10M 0,15M DNP-aa 20°C 40°C 20°C 40°C 40°C k1 k2 α k1 k2 α k1 k2 α k1 k2 α k1 k2 α Pro 40,12 50,91 1,27 24,26 29,73 1,23 26,23 33,18 1,27 16,25 19,88 1,22 9,97 12,14 1,22 Ser 38,40 49,88 1,30 21,77 26,63 1,22 25,40 32,92 1,30 14,72 17,99 1,22 8,98 10,94 1,22 Ala 42,63 55,22 1,30 24,97 30,95 1,24 27,91 36,04 1,29 16,64 20,58 1,24 10,51 12,94 1,23 Met -- -- -- 34,40 40,06 1,16 -- -- -- 25,50 29,80 1,17 16,09 18,76 1,17 Arg 3,29 3,78 1,15 1,97 2,25 1,14 3,20 3,67 1,15 1,90 2,16 1,14 1,75 2,06 1,18 3)      Efecto del modificador orgánico   Tabla 2. Factores de retención, de enantioselectividad y de asimetría para DNP-aas con fases móviles isoeluotrópicas formadas por metanol o acetonitrilo a pH= 5,50.       DNP-aa   MeOH 20% buffer 100mM pH=5,50 ACN 30% buffer 100 mM pH = 5,50 k1