Caracterización de la expresión de la metalotioneína 1G (MT1G) en el epitelio de tumores colorrectales humanos.

ARRIAGA JM; LEVY EM; BRAVO AI; MORALES BAYO S; BARRIO MM; ROBERTI P; ARIS MARIANA; HUERTAS E; LARRIPA I; MORDOH J; BIANCHINI M

Mar del Plata

Congreso; SAIC; 2009

Las metalotioneínas (MT) constituyen una familia de pequeñas proteínas ricas en cisteína, que cumplen una variedad de funciones asociadas al metabolismo de metales, a la inflamación y también al proceso oncogénico. En el ser humano existen cuatro isoformas, estando la MT1 compuesta por 9 subtipos funcionales, entre ellos la MT1G. En cáncer colorrectal, si bien se sabe que estas proteínas se encuentran sub-expresadas con respecto a la mucosa normal adyacente, la falta de anticuerpos capaces de discriminar entre sus isoformas hace que no se conozca su expresión individual. Previamente en nuestro laboratorio realizamos un estudio de microarreglos de cDNA, en el cual el cuarto transcripto de mayor sub-expresión tumoral resultó ser la MT1G. En el presente trabajo, validamos la sub-expresión tumoral de la MT1G por qRT-PCR en muestras enteras de tumores y mucosas normales del mismo paciente, obteniendo una sub-expresión tumoral en 3/7 casos, sin alcanzar diferencias significativas. Sin embargo, el análisis de las células epiteliales aisladas por microdisección láser, muestra sub-expresión significativa (p<0,05) en 7 de 9 casos (media=121 veces). Por inmunohistoquímica con el anticuerpo monoclonal anti-MT (clon E9, DAKO), corroboramos la sub-expresión de las MT1 y 2 en 16/17 tumores y 7/13 adenomas, y confirmamos la correlación entre la expresión proteica de éstas MTs y el mRNA de MT1G. Sin embargo, en contraste con lo observado in vivo, el análisis de 5 líneas colorrectales muestra que aquellas líneas positivas por inmunocitoquímica para MT1 y 2 son negativas para MT1G, y viceversa, indicando que probablemente haya otras isoformas alteradas en cáncer colorrectal. En conclusión, demostramos que la MT1G es una de las metalotioneínas que se encuentra sub-expresada in vivo por tumores colorrectales con respecto a la mucosa normal adyacente. Será interesante estudiar el rol que dicha sub-expresión pueda tener en la oncogénesis colorectal y su posible valor pronostico.