CARACTERIZACIÓN PRELIMINAR DE LA VÍA TLR2 EN LA INFECCIÓN DE CÉLULAS HUMANAS POR VIRUS JUNÍN

MARTINA CALDERONE; PABLO DANIEL THOMAS; LUCAS BACIGALUPO; EUGENIO ANTONIO CARRERA SILVA

Congreso; XIII CONGRESO ARGENTINO DE VIROLOGÍA; 2021

Estudios previos realizados por otros han revelado que los arenavirus patógenos del ViejoMundo inhiben la producción de citoquinas dependientes de TLR2 producidas en célulasmurinas. Posteriormente se informó que el virus Junín del Nuevo Mundo (JUNV), el agenteetiológico de la fiebre hemorrágica argentina, activaba esta vía en ratones después de lainoculación intracerebral.Con el objetivo de estudiar el rol de la vía TLR2 en células humanas, estudiamos la eventualactivación de esta vía en células humanas A549 por 2 variantes de JUNV con diferentespropiedades patogénicas.Se sembraron células A549 con una confluencia del 80% en placas de 96 pocillos. Un díadespués, se añadió una mezcla de anticuerpos irrelevantes o anticuerpos bloqueantes anti-TLR2 a 5 μg / ml (Invivogen, EE. UU.) 1 hora antes de la infección con la variante patógenaP3441 (P) y la cepa vacunal Candid 1 (C # 1) a 1 MOI. Una hora más tarde, se retiró el medio, seañadió medio fresco y las células se incubaron durante 24 horas más a 37ºC en una incubadoragaseada con 5% de CO 2 . Luego, se recolectaron los sobrenadantes para analizar los niveles deIL-6 usando un ELISA (BioLegend) y los niveles de virus infeccioso por titulación mediante latécnica de formación de placas. Los resultados mostraron que la presencia de anticuerpos anti-TLR2 bloqueantes redujo los niveles de IL-6 cerca del 50% con ambos virus. Por el contrario, laproducción de virus infecciosos se incrementó en las mismas condiciones. Actualmenteestamos realizando experimentos adicionales para confirmar estos resultados preliminares. Deconfirmarse los mismos, planeamos analizar el rol de las proteínas individuales de JUNV en laactivación de la vía TLR2.