Obtención de fragmentos de anticuerpos de llama dirigidos contra antígenos tumorales de melanoma metastásico.

LACREU, MARÍA LAURA; URRUTIA, MARIELA

Informes finales - Segunda cohorte. Becarios de Formación Inicial en Investigación en cáncer (2012-2013).

Instituto Nacional del Cáncer

Lugar: Ciudad Autónoma de Buenos Aires; Año: 2014; p. 96 - 101

El melanoma cutáneo es un tumor maligno cuya tasa de incidencia y mortalidad está en aumento en varias regiones del mundo. En la actualidad, no existen tratamientos efectivos contra el melanoma.Nos propusimos desarrollar anticuerpos (Acs) mediante una nueva estrategia, como son los Acs de dominio único (VHHs). Los VHHs tienen la ventaja de permitir identificar epítopes distintos de los reconocidos por Acs convencionales. Con el fin de identificar de nuevos antígenos (Ags) marcadores de melanoma, se inmunizaron llamas y a partir de sangre de las mismas se construyó una biblioteca de VHHs dirigida contra Ags de membrana de melanoma humano. La biblioteca obtenida constó de 1,7 x 107 clones. Su diversidad se estudió por digestión con enzimas de restricción, identificándose 9 patrones de digestión distintos entre los 20 clones evaluados.También se desarrolló el enriquecimiento en los VHHs que reconocen Ags de melanoma, y se observó la reactividad del pool de fagos-VHH que reconocen Ags de MHM aumenta con las sucesivas rondas de panning (DO490nm = 0,19; 0,45; 0,73 y 1,25, respectivamente para post 1º, 3º, 4º y 5º rondas). A continuación avanzaremos con la selección de los VHHs mediante la técnica de inmunohistoquímica utilizando biopsias de melanoma humano.