BECAS
MARURI alejandro
artículos
Título:
Culture of porcine luteal cells as a substrate for in vitro maturation of porcine cumulus oocyte complexes. Establishment and characterization
Autor/es:
TEPLITZ GM; MARURI A; CRUZANS PR; CAROU MC; LOMBARDO DM
Revista:
Spermova
Editorial:
ASPRA
Referencias:
Lugar: Lima; Año: 2016 vol. 2
ISSN:
2223-9375
Resumen:
El objetivo de este trabajo fue establecer y caracterizar el cultivo de c¨¦lulas luteales porcinas (CLP) para el posterior cocultivo de COC porcinos con el fin de promover la maduraci¨®n ovocitaria. Para el establecimiento y caracterizaci¨®n del mismo se realiz¨® la disecci¨®n de cuerpos l¨²teos obtenidos a partir de ovarios de frigor¨ªfico. El tejido luteal se someti¨® a digesti¨®n mec¨¢nica y enzim¨¢tica con colagenasa IV. La suspensi¨®n se filtr¨® y centrifug¨® y las c¨¦lulas se diluyeron en 15 mL de medio DMEM/F12 suplementado y se sembraron en 3 frascos de cultivo T25, incub¨¢ndose en ambiente controlado y renovando el medio cada 48 h. Para el an¨¢lisis y caracterizaci¨®n del mismo se realiz¨® la evaluaci¨®n del contenido de l¨ªpidos intracelulares por tinci¨®n con rojo Nilo, inmunocitoqu¨ªmica (ICQ) para 3¦Â-hidroxiesteroide deshidrogenasa (3¦ÂHSD) y determinaci¨®n de progesterona (P4) por ELISA. Se observ¨® la presencia de gotas lip¨ªdicas citoplasm¨¢ticas, una producci¨®n de P4 en forma creciente medida a las 48, 96 y 144 h de cultivo y casi la totalidad de las c¨¦lulas positivas a 3¦Â-HSD, demostrando la capacidad esteroidog¨¦nica de las c¨¦lulas en cultivo.
