Cascada de señales intracelulares genómicas y no genómicas en células de linfoma T murino inducidas por hormonas tiroides

MARÍA LAURA BARREIRO ARCOS; RICARDO N FARÍAS; ALICIA J KLECHA; HELENA STERLE; ANA MARÍA GENARO; GRACIELA ALICIA CREMASCHI

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clínica; 2008

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

Las HT ejercen acciones en el desarrollo, crecimiento y dife- renciación celular mediante afectos genómlcos y no genómicos. Se ha demostrado que regulan la respuesta inmune, pero se desco- nocen los mecanismos implicados. Previamente demostramos que las HT inducen la división de las células del linloma T BW 5147 (BVI) a través de la activación de PKCzeta. En este trabajo estudia- mos la cascada de señales intracelulares involucrada. Comproba- mos que bloqueantes selectivos de las esfingomielinasas acidas y neutras, imipramina y GW4869 respectivamente, lnnibleron los efectos de las HT sobre la proliferación y la actividad de PKCzeta. Por otra parte las HT, via PKCzeta, inducen la expresión proteica (cuanti- flcada por westem blot, WB) y genómica (por RT-PCR) de iNOS. En estos electos está involucrada la activación de NF-kB (determinado por EMSA). Tanto T3 como T4 acopladas a agarosa e im- permeables a la membrana celular, indujeron la respuesta proliferativa, aunque sus efectos fueron significativamente meno- res que los obtenidos con HT libres. Las HT acopladas a agarosa induleron una rápida traslocación y activación de PKC a la mem- brana celular (medida por tostorilación de un sustrato especifico), asimismo provocaron la degradación en citoplasma del IkB con la consecuente traslocación de NFkB al núceo (cuantificados por . WB y EMSA, respectivamente). El pretratamlento de las células BW con el pseudosuslrato de PKCzeta inhiblia estos efectos, así como también la induccion de la proliferación mediada por HT- agarosa. Ambas, HT y HT-agarosa incrementaron la fostorilación de ERK (evaluado por westem blot) respecto de celulas BW sin trata- miento hormonal. A diferencia de las HT, las HT-agarosa fueron inca- paces de inducir la expresión proteica y genómica de iNOS. Estos re- sultados indican que la acción de las HT sobre células BW involucran la activación no genómica de PKC, NFKB y ERK, llevan a la induc- ción genómica de la iNOS e incrementan así la proliferación celular