Determinación de actividad de acetilcolinesterasa en fase homogénea y heterogénea como respuesta enzimática indirecta

FILIPPINI, TOBÍAS RAMIRO; HUNT, ANDRÉS; LAGORIO, MARÍA GABRIELA; CORDON, GABRIELA; DIZ, VIRGINIA; GONZÁLEZ, GRACIELA

San Juan

Congreso; XII CONGRESO ARGENTINO DE QUIMICA ANALITICA; 2023

AAQA

Los compuestos organofosforados son un componente común de herbicidas, pesticidas, insecticidas y agentes nerviosos. Se consideran seguros para su aplicación en la agricultura debido a su rápida cinética de degradación. Sin embargo, cuando ocurre una exposición accidental, pueden producir toxicidad en humanos, plantas y animales. Son pesticidas inhibidores de la acetilcolinesterasa (ACIP), lo que conduce a trastornos respiratorios, reproductivos, nerviosos, hepáticos y renales en animales. Su acumulación en los alimentos y en el ambiente es una preocupación mundial y de ahí la importancia de monitorear su presencia1.La determinación de tiocolina es la forma indirecta de evaluar la actividad de la acetilcolinesterasa (AChE). La alta afinidad de la tiocolina (grupo tiol) por la superficie de plata se estudia en una suspensión de AgNps (medida espectrofotométrica) e inmovilizadas sobre una superficie (medida electroquímica)2.Se trabajó en concentraciones crecientes de enzima dejando constante la concentración del sustrato. En este trabajo se presentan medidas realizadas por espectroscopia de impedancia electroquímica (EIS) en una celda de tres electrodos serigrafiados. Los resultados del EIS se analizaron ajustando los datos a un modelo de circuito eléctrico equivalente R1[CP1(R2 CP2)] encontrándose que el valor de R2 (resistencia a la transferencia de carga) aumenta con la concentración de AChE permitiendo su cuantificación entre 0.006 y 0.12 UE/ml.A su vez en medidas espectrofométricas, cuanto mayor es la concentración de tiocolina generada, más se ve afectado el plasmón de las AgNPs, lo que se visualiza por cambios en su banda de absorción en la zona del visible. La absorbancia del plasmón disminuyó claramente al aumentar la concentración de enzima en un rango entre 0.006 y 0.3 UE/ml.Dadas las tendencias observadas y la alta especificidad de la reacción que genera la señal, son métodos prometedores para su uso en matrices biológicas. 1Sidhu, G. K., Singh, S., Kumar, V., Dhanjal, D. S., Datta, S. and Singh, J. Critical Reviews in Environmental Science and Technology 49 (13) (2019) 1135-1187. 2Pedre, I.,Méndez De Leo, L., Sánchez-Loredo, M. G., Battaglini, F., González, G.A. Sensors andActuators B 232 (2016) 383–389Agradecimientos: Universidad de Buenos Aires – CONICET – ANPCyT - OPCW