Insulina estimula la fosforilación de una proteína de 148 kDa en membranas de hígado de rata

JURI AYUB M; ALVAREZ S.E.; CIUFFO G.M

Mendoza. Argentina.

Congreso; XXXIV REUNIÓN ANUAL SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN EN BIOQUÍMICA Y BIOLOGIA CELULAR; 1998

La capacidad del receptor de insulina para fosforilar múltiples sustratos tanto intracelulares como en membrana es bien reconocida. En el presente estudio, se empleó un ensayo in vitro de estimulación de membranas de hígado de rata con insulina (10-9 a 10-6 M) y las proteínas fosforiladas fueron analizadas mediante Western blot. Se ajustaron las condiciones de la incubación, en cuanto a la relación ATP/Mg+2, concentración de insulina y tiempo de respuesta. En todas las preparaciones se observan dos bandas cuya fosforilación es inducida por insulina: una banda de 87 kDa y otra de 148 kDa ± 6.23 (media ± SEM, n=6). La banda de 87 kDa correspondería a la subunidad b del receptor de insulina. En nuestras preparaciones, no observamos el sustrato del receptor de insulina (IRS) cuyo peso molecular es del orden de 185 kDa. La respuesta es concentración dependiente, ya que se observa a concentraciones del orden de 10-9 M, las cuales son del orden de las concentraciones fisiológicas. Por otra parte, la respuesta fue rápida y transiente, ya que a los 7 min se observa un máximo. Hay observaciones contradictorias con respecto a la activación por insulina de PLCg, proteína cuyo peso molecular estaría en el orden del PM de la proteína observada en nuestros experimentos. Si bien estas evidencias no son concluyentes en este aspecto, sugieren que insulina estaría fosforilando otros sustratos además de los ya descriptos.