Caracterización del complejo de las proteínas ribosomales P en Trypanosoma cruzi

MAXIMILIANO JURI AYUB; BENSON NYAMBEGA; MARIANO J. LEVIN

Mendoza, Argentina

Congreso; VII Congreso Argentino de Protozoología y Enfermedades Parasitarias; 2005

Sociedad Argentina de Protozoología

Las proteínas P forman una protuberancia en la subunidad ribosomal mayor de los organismos eucariotas, involucrada en la etapa de elongación durante la síntesis de proteínas. El número de proteínas P varía en distintos organismos, por lo que esta región presenta variabilidad dentro de una estructura muy conservada como el ribosoma. La finalización del Proyecto Genoma de T. cruzi permitió completar el clonado del sistema de proteínas P de este parásito: TcP0 (35 kDa), y TcP1a, TcP1b, TcP2a, TcP2b, todas de ~11 kDa. Mediante ensayos de doble híbrido en levaduras, evaluamos las interacciones dentro del complejo, demostrando que TcP0 es el componente central ya que interactúa directamente con todas las otras proteínas P. Este patrón de interacciones diferencia a T. cruzi de otros organismos estudiados. Posteriormente, identificamos en TcP0 una región de 19 aminoácidos responsable de la interacción con las proteínas TcP1/TcP2. Este péptido representa la región menos conservada de TcP0. Finalmente, estudiamos la conformación estructural de las proteínas P de T. cruzi. Las proteínas TcP1/TcP2 no presentan plegamiento terciario. Por el contrario, ensayos de fluorescencia, dicroísmo circular y proteólisis limitada sugieren que la proteína TcP0 posee un dominio N-terminal globular con estructuras tipo alfa y beta, unido a un dominio C-terminal sin estructura compacta. Mediante ensayos de digestión limitada con proteasas se observo que el péptido que interactúa con las proteínas TcP1/TcP2 se encuentra parcialmente inaccesible en la estructura tridimensional de TcP0.