Nanovesículas con curcumina para terapia fotodinámica antitumoral

ALTUBE, MARIA JULIA; CAPUTO, EZEQUIEL; MORILLA, MARÍA JOSE; ROMERO, EDER LILIA

La Plata

Jornada; I Jornada de Divulgación de la Biotecnología; 2022

El cáncer de pulmón es una de las principales causas de muerte en Argentina. Uno de los tratamientos que se utiliza para tratar esta enfermedad es la terapia fotodinámica (TFD), que consiste en la activación de agentes fotosensibilizadores que generan especies reactivas de oxígeno (ERO) al ser irradiados con luz. La curcumina (Cur) es un polifenol hidrofóbico que tiene capacidad fotosensibilizante. Sin embargo, su uso terapéutico se ve limitado por su pobre biodisponibilidad. Previamente y con el objetivo de desarrollar una terapia inhalatoria de Cur se han diseñado nanovesículas con Cur utilizando arqueolípidos, denominadas nATC, resistentes a la nebulización y almacenamiento [1]. En este trabajo se busca analizar la capacidad de nATC de actuar como agente fotosensibilizador en la realización de una terapia fotodinámica antitumoral y comparar su efecto con liposomas convencionales con Cur (nLTC) y con Cur libre.Para llevar a cabo los ensayos, las células de adenocarcinoma pulmonar humano (línea celular A549) se incubaron con las formulaciones nATC, nLTC y Cur libre durante una hora y luego se irradiaron en un dispositivo con luces LED de 420 nm a diferentes fluencias. Mediante el ensayo de MTT y la determinación de la liberación de LDH se pudo observar que las muestras con Cur sólo ocasionan daño en las células luego de ser irradiadas. El ensayo de MTT arrojó que el IC50 de nATC era inferior al de nLTC y la Cur libre. La capacidad de las muestras de inhibir la migración celular se determinó mediante el ensayo de cierre de herida. nATC y Cur libre lograron inhibir el cierre de la herida durante 4 días, por su parte nLTC no mostró diferencias respecto del control sin tratar. Se determinó la actividad de las metaloproteinasas de matriz (MMP) liberadas por las células tratadas mediante zimografía y la utilización del péptido FS-6. Ambos resultados mostraron que, a diferencia de nLTC, nATC ocasiona una inhibición en la actividad de las MMP, independiente de la irradiación. La inhibición de la migración y la liberación de MMP son un indicativo de que nATC podría limitar la metástasis de las células tumorales. Buscando determinar el perfil de activación de los macrófagos asociados a tumores se realizó un ensayo donde se incubaron células THP-1, diferenciadas en macrófagos, con los medios condicionados de las células A549 tratadas con las distintas muestras. nATC y nLTC causaron una disminución de la aparición de células CD204+, marcador de macrófagos en perfil M2 protumoral, a su vez nATC también incrementó la liberación de IL-6 e IL-8 por parte de los macrófagos. Estos resultados sugieren una mayor aparición de macrófagos activados en perfil M1, antitumoral. Por los resultados expuestos se puede señalar que nATC muestra mejores características que nLTC y Cur libre para la realización de una terapia fotodinámica antitumoral. CITAS[1] Altube M.J., Caimi L.I., Huck-Iriart C., Morilla M.J. y Romero E.L. Pharmaceutics 13 (2021) 1033.