PRIMERA CARACTERIZACIÓN DE PECES KNOCKOUT DEL RECEPTOR DE GnIH EN MEDAKA 0ryzias latipes

PAHÍ-ROSERO, A.M. ; BOAN, A.F. ; LÓPEZ, G.C.; HERDMAN, J. ; FERNANDINO, J.I. ; VISSIO, P.G. ; SOMOZA, G.M.

Chascomús

Simposio; VII Simposio Argentino de Ictiofisiología; 2022

La hormona inhibidora de gonadotrofinas (GnIH) es un neuropéptido perteneciente a lafamilia RFamidas que inhibe el eje reproductivo en aves y mamíferos. Sin embargo, suacción en peces no ha sido claramente establecida. El objetivo de este trabajo fue silenciarel gen codificante para el receptor de GnIH mediante CRISPR/cas9 en medaka. Segeneraron mutaciones bialélicas (indeles en individuos F0) en embriones antes de laprimera división celular, inyectando cas9 ARN (cas9) y ARN guía (ARNg) con un inyectorautomático Nanoject II (Drummond Scientific) acoplado a un micromanipulador M-152(Narishige) y un microscopio estereoscópico (Olympus). Estos individuos se dejaron crecera 24°C ± 1°C hasta adultos. Se realizaron dos muestreos, uno al mes 1 y el otro al mes 3 deedad. De cada individuo se registró peso y talla, se tomaron muestras de cabeza y troncopara histología y de aleta caudal para determinar el sexo genotípico. No se encontrarondiferencias significativas entre los grupos control y knockout en peso y talla. Sin embargo,en el análisis histológico de las gónadas (tanto ovarios como testículos) mostraron que losindividuos tratados se encontraban en una fase más avanzada de desarrollo gonadalcomparada el grupo control al mes de vida. Mientras que al mes 3 no se observarondiferencias en el desarrollo gonadal entre grupos. Estos resultados sugieren una posibleinfluencia de GnIH sobre el desarrollo gonadal temprano. Es importante destacar que nohemos encontrado referencias bibliográficas al respecto lo que significaría que estetrabajo representa la primera aproximación al tema.