EFECTO DE CLORURO DE SODIO Y SACAROSA EN LA CAPACIDAD DE FORMAR BIOFILM DE Yersinia enterocolitica

LUCERO ESTRADA CECILIA STELLA MARYS; GAURÓN, MARÍA CLESTE; ESCUDERO MARÍA ESTHER

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XI Congreso Latinoamericano de Microbiología e Higiene de Alimentos (COLMIC), el IV Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos (CAMA) y el III Simposio Argentino de Conservación de Alimentos (SACA); 2012

Asociación Argentina de Microbiología

En muestras alimenticias los microorganismos se encuentran formando biofilms lo que les confiere resistencia a desinfectantes y diferentes tratamientos químicos. Por otra parte, existen condiciones ambientales tales como la accesibilidad a los nutrientes y la fuerza iónica que pueden afectar su formación. Yersinia enterocolitica es un enteropatógeno que se transmite por agua y alimentos contaminados. Un método tradicional para la preservación de los alimentos es el uso de sacarosa o NaCl para obtener condiciones de alta osmolaridad. El objetivo de este trabajo fue estudiar la capacidad de Y. enterocolitica para formar biofilms bajo distintas concentraciones de NaCl y sacarosa, en dos superficies diferentes. Se estudiaron dos cepas formadoras de biofilms aisladas desde chorizo de cerdo: Y. enterocolitica CLC001 (1A/O:7,8-8-8,19) y Y. enterocolitica GFO004 (2/O:9). Un cultivo de 18 h a 25 °C en caldo tripticase soja (TSC), se diluyó en tubos de TSC con NaCl o sacarosa (0,00; 0,50; 1,00, 1,50 y 2,00 M) hasta obtener una DO a 610 nm de 0,05. Se determinó la capacidad de formar biofilm por dos métodos: a) 150 µl de cada dilución se colocaron en 8 pocillos de una placa de poliestireno. Se incubó a 25 °C por 24 h y se determinó la formación de biofilm por la técnica de cristal violeta (CV), y b) 5 ml de cada tubo se colocaron en sendas placas de Petri que contenían un cubreobjetos de vidrio estéril y se incubaron 24 h a 25 °C. Luego se realizó recuento en agar Mac Conkey y coloración de Gram. La capacidad de ambas cepas para formar biofilms fue significativamente afectada por las superficies de adhesión y  los factores químicos ensayados (p < 0.05). Para NaCl, por a) no se observó  formación de biofilms a partir de 1,5 M.  Por b) se observó una disminución del recuento de 2,75 log10 con 2 M de NaCl en relación al caldo sin sal. Por microscopía, se observaron significativos cambios morfológicos en los biofilms como la presencia de células filamentosas y de gran tamaño a 1 y 1,5 M de NaCl. En relación a sacarosa, por el método a) no se observó formación de biofilm a 2 M; por el método b) la disminución del recuento fue de 2 log10 a igual concentración. Por microscopía no se observaron cambios morfológicos de las bacterias en biofilms. A pesar de que altas concentraciones de NaCl y sacarosa se han utilizado para la conservación de alimentos, este trabajo demuestra que Y. enterocolitica es capaz de sobrevivir formando biofilms aún en presencia de alta fuerza iónica.