Naftoquinonas como inhibidoras de la formación de biofilm de una cepa de Yersinia enterocolitica aislada de alimento.

MASTRODONATO, ANNA CHIARA; DI MARCO, NATALIA; CARLOS RODOLFO PUNGITORE; LUCERO ESTRADA CECILIA STELLA MARYS

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología y XIV Congreso Argentino de Microbiología ALAM-CAM; 2016

Asociación Argentina de Microbiología

Yersinia enterocolitica es un cocobacilo Gram negativo que pertenecen a la familia Enterobactereaceae. Es patógena para el ser humano y animales de sangre caliente. Se aísla frecuentemente de muestras provenientes de agua, animales y de una gran variedad de alimentos. La principal vía de transmisión es la oral, por ingestión de agua o alimentos contaminados, en donde puede alcanzar una elevada concentración, aun si estos se conservan refrigerados. A 25ºC tiene la capacidad de formar biofilms, los cuales son acúmulos de células bacterianas rodeadas principalmente por polisacáridos altamente hidratados que les proporcionan a las bacterias implicadas protección frente a múltiples condiciones medioambientales adversas. Y. enterocolitica posee un sistema de comunicación intercelular denominado Quorum Sensing (QS) el cual le permite comunicarse entre ellas mediante moléculas químicas denominadas N-acil-homserina lactonas, para desarrollar comportamientos coordinados dependientes de la densidad celular, como la formación de biofilm, entre otros. Las naftoquinonas son un grupo de compuestos químicos presentes en una gran variedad de plantas por lo cual se utilizan como base en la medicina tradicional. Se ha demostrado que algunos representantes de este grupo de compuestos son capaces de inhibir la formación de biofilms de varias especies bacterianas. La alta aparición de cepas resistentes a diversos antimicrobianos debido a su uso indiscriminado, ha llevado a la búsqueda de nuevos compuestos que inhiban factores de virulencia como el biofilm, en vez de inhibir el crecimiento planctónico de las células, lo que llevaría a una menor resistencia, es por esto que el objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad de un grupo de 28 naftoquinonas, obtenidos mediante semi-síntesis química, en el desarrollo de biofilm de la cepa Y. enterocolitica CLC001 biotipo 1A, aislada de alimentos. Para la búsqueda de inhibidores de biofilm se realizó un screening utilizando la técnica del cristal violeta con caldo tripticase soja suplementado con 0,25% de glucosa seguido de la determinación de la Mínima Concentración Inhibitoria de Biofilm (CIMB). Por último se evaluó el QS como posible mecanismo inhibidor de biofilm midiendo diámetros de halos de violaceína producidos por la cepa biosensora Chromobacterium Violaceum 026 cuando está en contacto con homoserina lactonas provenientes de Y. enterocolitica. De los 28 compuestos estudiados, fueron inhibidores de biofilm el 2, 16, 21, 22, 23 y 24, ninguno de ellos inhibió el crecimiento planctónico. Se determinó la CIMB para los compuestos 2, 21, 22 y 23 siendo estas de 25; 12,5; 25 y 3,05 µM respectivamente. Ninguna de estas naftoquinonas mostró inhibición del QS, indicando que el efecto inhibidor que ejercen sobre esta cepa es llevado a cabo mediante otro mecanismo de acción. Estos resultados demuestran el potencial de estas naftoquinonas para inhibir la formación de biofilm de este importante microorganismo enteropatógeno.