INVESTIGADORES
ERLEJMAN Alejandra Giselle
congresos y reuniones científicas
Título:
CHARLA CORTA SELECCIONADA: Estudio de las proteínas FKBP como nuevo blanco en la modulación de NF-kappaB por drogas y compuestos naturales que modulan la respuesta de NF-kB
Autor/es:
CAMISAY M.F.; DE LEO S.A.; MAZAIRA G.I.; CAUERHFF A.; GALIGNIANA M.D.; ERLEJMAN A.G.
Lugar:
Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; LIX REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2014
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
NF-kB regula la expresión de genes involucrados
en la inflamación, proliferación celular y apoptosis. Previamente
reportamos que proteínas de la familia FKBP
(FK506-Binding Protein) modulan la actividad transcripcional
de NF-kB, tal que FKBP51 inhibe su activación y
su homóloga FKBP52, la estimula. Las FKBPs tienen
actividad de peptidil-prolil isomerasa (PPIasa), la cual
es inhibida por el macrólido FK506. Aquí estudiamos la
relevancia del dominio PPIasa de ambas FKBPs en la
modulación de NF-kB. Su actividad transcripcional se
evaluó por ensayos de gen reportero en células HEK
293T, y en células BeWo se analizaron efectos biológicos
endógenos NF-kB-dependientes, como la secreción de
IL-6 (por ELISA) y la activación de MMP (por zimografía).
En células estimuladas con PMA, la preincubación con
FK506 no alteró el efecto inhibitorio de FKBP51, pero
si bloqueó la estimulación por FKBP52, sugiriendo el
requerimiento de la actividad de PPIasa en este caso.viamente
reportamos que proteínas de la familia FKBP
(FK506-Binding Protein) modulan la actividad transcripcional
de NF-kB, tal que FKBP51 inhibe su activación y
su homóloga FKBP52, la estimula. Las FKBPs tienen
actividad de peptidil-prolil isomerasa (PPIasa), la cual
es inhibida por el macrólido FK506. Aquí estudiamos la
relevancia del dominio PPIasa de ambas FKBPs en la
modulación de NF-kB. Su actividad transcripcional se
evaluó por ensayos de gen reportero en células HEK
293T, y en células BeWo se analizaron efectos biológicos
endógenos NF-kB-dependientes, como la secreción de
IL-6 (por ELISA) y la activación de MMP (por zimografía).
En células estimuladas con PMA, la preincubación con
FK506 no alteró el efecto inhibitorio de FKBP51, pero
si bloqueó la estimulación por FKBP52, sugiriendo el
requerimiento de la actividad de PPIasa en este caso.FK506-Binding Protein) modulan la actividad transcripcional
de NF-kB, tal que FKBP51 inhibe su activación y
su homóloga FKBP52, la estimula. Las FKBPs tienen
actividad de peptidil-prolil isomerasa (PPIasa), la cual
es inhibida por el macrólido FK506. Aquí estudiamos la
relevancia del dominio PPIasa de ambas FKBPs en la
modulación de NF-kB. Su actividad transcripcional se
evaluó por ensayos de gen reportero en células HEK
293T, y en células BeWo se analizaron efectos biológicos
endógenos NF-kB-dependientes, como la secreción de
IL-6 (por ELISA) y la activación de MMP (por zimografía).
En células estimuladas con PMA, la preincubación con
FK506 no alteró el efecto inhibitorio de FKBP51, pero
si bloqueó la estimulación por FKBP52, sugiriendo el
requerimiento de la actividad de PPIasa en este caso.
Ello fue confirmado por el uso de mutantes puntuales de
FKBP52 carentes de actividad PPIasa (FKBP52 F67Y y
FKBPP52 F130Y), siendo ello revertido por cotransfección
con wtFKBP52. Se sabe que el flavonoide naturalción
con wtFKBP52. Se sabe que el flavonoide natural
epigalocatequina-galato (EGGC) inhibe efectos NF-kBdependientes,
por lo que hipotetizamos que ello podría
deberse a la inhibición de FKBP52. La preincubación
de las células con EGCG bloqueó el efecto estimulante
de FKBP52. Se evaluó entonces la posible presencia
de un sitio de unión a EGCG en FKBP52 por modelado
molecular con SwissDock (servidor específico para unión
proteína-ligando) utilizando las estructuras de FKBP52:
1N1A, 1Q1C, 1QZ2 y 4LAX (Protein Data Bank). Discriminando
por parámetros estructurales y estadísticos se
predijeron estructuras EGCG-FKBP52 donde el sitio de
unión de EGCG involucra a las Phe67 y Phe 130 del sitio
activo de FKBP52. Concluimos que el dominio PPIasa de
FKBP52 es un nuevo blanco regulatorio de la acción de
NF-kB, y proponemos que la acción de EGCG es debida
a tal regulación67 y Phe 130 del sitio
activo de FKBP52. Concluimos que el dominio PPIasa de
FKBP52 es un nuevo blanco regulatorio de la acción de
NF-kB, y proponemos que la acción de EGCG es debida
a tal regulación