Efecto de SGT y 14.3.3 sobre la regulacion de GR y AR

MAZAIRA G.I.; MOLINARI A.M.; ERLEJMAN A.G.; GALIGNIANA M.D.

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2012

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

Los receptores esteroidales forman complejos con Hsp90 y una proteina TPR (tetratricopeptide repeat). La orientacion de sus a-helices antiparalelas le permite a algunas proteinas TPR asociarse con Hsp90 regulando asi el retrotransporte y/o la actividad transcripcional de los receptores. Previamente demostramos que la union de esteroide favorece el recambio de la proteina TPR FKBP51 por FKBP52, la que favorece el retrotransporte de receptores via dineina y estimula su actividad transcripcional. Nuestro objetivo fue estudiar los efectos de otras proteinas TPR tales como 14-3-3s y SGT-1a sobre GR y AR habida cuenta que estos receptores poseen acciones opuestas en ciertos tipos de canceres como el prostatico. Mientras que AR se comporta como un oncogen, GR es supresor tumoral. En ausencia de hormona, la fraccion nuclear de GR fue significativamente menor (P=0,05) que en celulas normales (31,5±4,2%) cuando se sobreexpres o a 14-3-3s (20.2±3,1%) o el dominio TPR aislado (11,3 ±2,7%), siendo la velocidad de importacion de GR menor (t0,5 = 4, 8 y12 respectivamente). Sin embargo la sobreexpresion de SGT-1a no afecto significativamente tal propiedad. Ensayos de co-inmunoprecipitacion demostraron que 14-3-3s forma complejos con GR, pero no asi SGT-1a, sugiriendo que 14-3-3s desplaza al complejo FKBP52-dineina. Tanto 14-3-3s como SGT-1a afectaron la actividad transcripcional de GR y AR, pero con patrones de modulacion diferentes. Mientras que GR mostro curvas de activacion bifasicas con ambas proteinas TPR (i.e., activacion seguida de inhibicion a mayor expresion), AR fue siempre activado independientemente del nivel de expresion de la proteina TPR. Estos resultados sugieren que la regulacion ejercida por SGT-1a y 14-3-3s sobre ambos receptores no seria dependiente de Hsp90 y ocurriria a nivel nuclear, y que sus elevados niveles de expresion como los encontrados en celulas tumorales prostaticas favoreceran el efecto oncogenico de AR en detrimento del efecto supresor de GR.