Regulacion de la localizacion subcelular y de la actividad transcripcional de GR por las proteinas TPR 14-3-3sigma y PP5

MAZAIRA G.; MONTE M.; ERLEJMAN A.G; GALIGNIANA M.D.

Mar del Plata

Congreso; LV Reunion Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2010

Sociedad Argentina de Investigacion Clinica

GR forma complejos con hsp90, hsp70, p23 y una proteina TPR. Segun la secuencia y la orientacion espacial de sus alpha-helices antiparalelas de dominios de 34 aa, algunas proteinas TPR se unen a hsp90. Es asi como CyP40, PP5, FKBP51 y FKBP52 se asocian a receptores esteroidales. En trabajos previos demostramos que la union de hormona favorece el recambio de FKBP51 por FKBP52, la que a diferencia de FKBP51, favorece el retrotransporte de GR y su actividad transcripcional. Se ha reportado que 14-3-3sigma retiene a GR en el citoplasma e inhibe su actividad transcripcional. Estudios cristalograficos muestran que 3 de las 9 alpha-helices de 14-3-3 superponen su geometria con la de los dominios TPR de PP5. Aqui evaluamos la posible redundancia funcional sobre GR de ambas proteinas. La inmunoprecipitacion de GR coadsorbe a hsp90, FKBP52 y PP5, pero tambien a 14-3-3sigma. En ausencia de esteroide, GFP-GR se excluye del nucleo en proporcion significativamente mayor (P0,05) que en ceulas normales (31,5; ES 4,2%) al sobreexpresar a 14-3-3sigma (20,2; ES 1%) o al dominio TPR de PP5 (11,3; ES 2,7%), siendo la velocidad de importacion de GR menor (t0,5 = 4, 8 y 12 minutos, respectivamente) . En contraste, la sobreexpresion de PP5 muestra una mayor proporcion de GR nuclear (50,7; ES 4,6%) y mayor enlentecimiento del transito (t0,5 =22). La velocidad de exportacion nuclear tambien se enlentece, siendo los t0,5 de 13,5 h (control), 4 h (14-3-3), 3,5 h (PP5) y 2 h (TPR). Mientras que TPR inhibe la actividad transcripcional, PP5 y 14-3-3 muestran un perfil bifasico (activacion seguida de perdida de activacion o de franca inhibicion para el caso de 14-3-3). En resumen, si bien 14-3-3 y PP5 poseen dominios TPR similares y efectos transcripcionales equivalentes, sus accion sobre el transporte de GR es opuesta (14-3-3 favorece la retencion citoplasmatica y PP5 la nuclear). El dominio TPR aislado es siempre inhibitorio (transcripcion y transporte) debido a su eficiencia para competir con cualquier otro factor TPR.