Regulación del factor de transcripción NF-kappaB por inmunofilinas de alto peso molecular

ERLEJMAN A.G.; MAZAIRA G.; MONTE M.; GALIGNIANA M.D.

Ciudad de Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas y Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008

9. Sociedad Argentina de Investigaciones Clínicas y Sociedad Argentina de Fisiología

La activación de NF-kB (RelA/p50) depende de la fosforilación del inhibidor lkB por IKK, cuya actividad es regulada por hsp90. Previamente demostramos que las inmunofilinas (IMMs) FKBP51 y FKBP52 asociadas a hsp90 regulan el retrotransporte y la actividad transcripcional de receptores esteroidales y p53. El objeto de este trabajo fue elucidar si las IMMs regulan la activación de NF-kB. En células estimuladas con PMA, FKBP51 inhibió la respuesta transcripcional de NF-kB, resultado que no varió al usar una mutante de FKBP51 en el dominio TPR responsable de su unión a hsp90. Esto sugiere que la modulación de NF-kB depende de la IMM misma sin necesidad de que ésta forme complejos con hsp90. No obstante, en células tratadas con el inhibidor de hsp90 radicicol, no se detectó activación de NF-kB, indicando que hsp90 sí modula a NF-kB, pero en un paso diferente al de FKBP51. Como RelA co-inmunoprecipitó con FKBP51, hipotetizamos que la actividad de peptidil-prolil isomerasa de la IMM podría afectar la conformación de RelA, por lo que repetimos el ensayo en células incubadas con el inhibidor FK506. El efecto de FKBP51 no se modificó, por lo que concluimos que la conformación de RelA no se vería afectada significativamente por su asociación con la IMM. El efecto inhibitorio de FKBP51 sobre NF-kB es específico ya que su homóloga FKBP52 no tuvo efecto alguno. La translocación nuclear de RelA inducida por PMA fue máxima a los 30 min para luego reciclar al citoplasma a los 60 min. La cotransfección de FKBP51 retrasó la cinética de importación. En resumen, aquí demostramos que: a) FKBP51 inhibe la activación de NF-kB; b) a diferencia de lo ya demostrado para receptores esteroidales, la IMM no requiere formar complejos con hsp90, c) su actividad de peptidil-prolil isomerasa no es esencial, d) hsp90 está involucrada en la regulación de la cascada a otro nivel. Especulamos que el efecto de FKBP51 puede ser sobre IKK, la translocación nuclear de RelA y/o el sitio promotor.