Modificaciones de la membrana de eritrocitos humanos expuestos a Plasmodium falciparum relacionadas con el metabolismo de ATP extracelular.

BLANCO, RENATA; SAFFIOTI, NICOLÁS; SCHWARZBAUM, PABLO JULIO; ALVAREZ, CORA LILIA

Buenos Aires

Congreso; XXXIII Reunión Anual SAP 2022 Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Sociedad Argentina de Protozoología

La infección de glóbulos rojos (GR) por Plasmodium falciparum promueve la agregación y la adhesión de glóbulos rojos infectados (GRi) al endotelio vascular, causando obstrucciones que impiden el flujo sanguíneo. Los GR transportan oxígeno y regulan el tono vascular a través de la liberación de ATP. La enfermedad transcurre con parasitemia baja (3-4%); de manera tal que ~96% de la población de GR son no infectados (GRni). Previamente demostramos que los GRni exhiben incrementos en la concentración de ATP extracelular (ATPe), que depende de la liberación de ATP intracelular y de la hidrólisis de ATPe por ectonucleotidasas. El objetivo de este trabajo es estudiar la deformabilidad y la capacidad de agregación de GRni y su asociación con el ATPe. La hipótesis es que los GRi modifican la membrana plasmática de los GRni afectando la deformabilidad y la agregación con consecuencias sobre la homeostasis del ATPe. Los GR se cultivaron por 48 horas en presencia de P. falciparum (NF54), a partir de éstos cultivos se purificaron los GRni. Las determinaciones de ATPe se realizaron por luminiscencia. La deformabilidad se estudió en un dispositivo que mimetiza los sinusoides del bazo cuantificando el ATP antes y después del evento de deformación mecánica. La agregación inducida por plasma sanguíneo se determinó por espectrofotometría y por microscopía óptica.Los resultados mostraron que la deformabilidad produjo un aumento en la [ATPe] entre 4 y 6 veces sobre los valores basales tanto en GRni como en GR control; es decir, cultivados en ausencia de P. falciparum. En GR control, la agregación aumentó en presencia de concentraciones crecientes de plasma. ATP y AMP exógenos no modificaron la agregación, mientras que el ADP promovió la agregación de manera similar al control positivo. Experimentos similares están siendo desarrollados con GRni para entender su rol en las obstrucciones vasculares y la anemia, que son las principales manifestaciones clínicas de la enfermedad.