ELISA DE AVIDEZ DE DILUCIÓN ÚNICA COMO ALTERNATIVA A LA SERONEUTRALIZACIÓN VIRAL PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA DIARREA VIRAL BOVINA (DVB)

M.A. LAVORIA, M. WILDA, M ERGUIZ, O. FRANCO MAHECHA, A. CAPOZZO.

Buenos Aires, Argentina

Congreso; III Jornadas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria; 2010

La neutralización viral (VNT) es la prueba de referencia para el diagnóstico y la evaluación de potencia de vacunas contra DVB. VNT es difícil de estandarizar, consume tiempo y requiere de instalaciones de bioseguridad. Como alternativa a la VNT, desarrollamos un formato de ELISA de bloqueo (AB ELISA) para la medición de la avidez de anticuerpos séricos contra la glicoproteína E2 del Virus de la Diarrea Viral Bovina (VDVB). El ensayo utiliza la E2 recombinante soluble expresada en el sistema Baculovirus-células de insecto y un suero de alto título neutralizante que permite detectar el bloqueo de la unión de anticuerpos específicos anti E2 y determinar su avidez utilizando un agente caotrópico. AB ELISA fue estandarizada para evaluar una única dilución de la muestra permitiendo procesar 90 sueros por placa. La prueba fue validada con 187 sueros bovinos: 100 VNT negativos y 87 VNT positivos correspondientes a animales infectados o vacunados (vacuna inactivada). AB ELISA resultó ser 100% específica y 98.8% sensible. El índice de Avidez de los anticuerpos séricos anti-E2 mostró una excelente correlación (r=0.90) con los títulos obtenidos por VNT, permitiendo incluso diferenciar animales vacunados de infectados. AB ELISA de dilución única puede considerarse como una alternativa a la prueba de seroneutralización viral con la ventaja de ser rápida, segura y de bajo costo. Estos datos sugieren que la avidez se relaciona con la capacidad de los anticuerpos anti BVDV-E2 para bloquear la infección viral in vitro y se puede utilizar para discriminar entre animales vacunados e infectados.