Aumento de Estradiol y activacIón de metaloproteinasas -2 y -9 en un modelo de endometriosis murina knockout para el receptor p55 de TNF¦Á

GHERSA F ; VALLCANERAS S; BAST¨®N JI; MERESMAN GF; CASAIS M

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiolog¨ªa (SAFIS); 2015

Endometriosis es una enfermedad que afecta a las mujeres en edad reproductiva causando dolor e infertilidad con un cuadro de inflamación crónica. El objetivo de este estudio fue estudiar la influencia de la ausencia del receptor p55 para el factor de necrosis tumoral alfa (TNFalfa) en el desarrollo de las lesiones endometriosicas. Trabajando con ratones C57BL/6 knock-out (KO) para el receptor p55 y wild type (WT) como control, se indujo la endometriosis quirúrgicamente. Brevemente, el cuerno uterino derecho fue dividido longitudinalmente y cortado en tres piezas que se suturan al mesenterio del intestino. A las 4 semanas, los ratones fueron sacrificados, se recolectó el fluido peritoneal (FP) para el dosaje de estradiol (E2) por RIA y la determinación de la actividad enzimática de las metaloproteinasas 2 y 9 (MMP-2 y -9) mediante zimografía. Una lesión por animal fue fijada en buffer 10% de formaldehido, embebida en parafina, cortada en secciones de 5 mm y preparada para la evaluación de la proliferación celularpor inmunohistoquímica (IHQ) empleando un anticuerpo policlonal anti-PCNA (antígeno nuclear de proliferación celular). El resto de las lesiones se conservaron a -80°C hasta el análisis de la concentración de la enzima anabólica de E2, citocromo p450 (citp450) mediante western blot (WB). En los animales KO se observó un aumento en los niveles de E2 en FP sin modificación en la expresión proteica de su enzima anabólica así como también un incremento en la actividad de la enzima MMP-2. La  IHQ dePCNA reveló un aumento significativo en la proliferacion celular en laslesiones endometriosicas en el grupo KO respecto del grupo WT (p<0,01). En conclusión, la ausencia del receptor p55 afectaría el crecimiento de la lesión, causada por una mayor tasa de proliferación celular, promoviendo la liberación de E2 que afectaría la activación de las MMP-2 y -9 permitiendo la remodelación y establecimiento de las lesiones.