Efecto del plaguicida clorpirifos sobre la proliferación y el balance redox de líneas celulares tumorigénicas

VENTURA C, PONTILLO C, RANDI A, VENTURINO A, RIVERA E, COCCA C, NUÑEZ M.

Jornada; XXVIII Jornadas Multidisciplinarias de Oncología del Instituto ?Ángel H. Roffo?; 2012

El clorpirifos (CPF) es un compuesto organofosforado empleado en nuestro país para el control de plagas e insectos. Sus efectos neurotóxicos han sido ampliamente demostrados pero no explican las acciones carcinogénicas que le han sido adjudicado. Hemos descripto recientemente que el CPF a dosis ambientales es capaz de inducir la proliferación celular en forma dependiente del receptor de estrógeno alfa en la línea celular MCF-7. Dosis más elevadas (50 µM) del plaguicida indujeron la disminución de la proliferación en esta línea. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del CPF sobre el crecimiento y el estado redox en diferentes líneas celulares tumorigénicas humanas. Se evaluaron dos derivadas de carcinomas mamarios (MCF-7 y MDA-MB-231), una derivada de un adenocarcinoma pancreático (PANC-1), y dos de melanoma (WM35 y M1/15). Las concentraciones de CPF utilizadas variaron desde 5x10-2 a 50 µM. La proliferación celular se evaluó mediante recuento clonogénico. El contenido de especies reactivas del oxigeno (ROS) y las fases del ciclo celular fueron determinados por citometría de flujo utilizando la sonda DCF-2DA y el fluorescente ioduro de propidio, respectivamente. Las actividades catalasa y superóxido dismutasa (SOD) fueron evaluadas espectrofotométricamente y su expresión mediante Western blot. Se evaluó la peroxidación lipídica por espectrometría. En las líneas MCF-7 y MDA-MB-231, CPF 50 µM produjo disminución de la proliferación y arresto del ciclo celular junto con un aumento en el contenido de ROS y de la actividad catalasa. En las células MCF-7 tratadas con CPF 50 y 5 µM la actividad SOD disminuyó respecto al control, sin cambios en la línea MDA-MB-231. Asimismo, observamos un aumento en la peroxidación lipídica en las células MCF-7 expuestas a CPF 50 µM. La exposición de las líneas WM35 y M1/15 a CPF 50 µM disminuyó la capacidad clonogénica, incrementó los niveles de ROS y la actividad catalasa. No observamos modificaciones en el ciclo celular en estas líneas por acción del plaguicida. Finalmente, la exposición de las células PANC-1 a CPF 50 µM produjo una disminución en la capacidad clonogénica, sin alterar los niveles de ROS ni la cantidad y actividad de la enzima catalasa. Sin embargo, la exposición de estas células a CPF 5x10-2 µM condujo a un aumento en la capacidad clonogénica, lo cual fue observado previamente en las células MCF-7 expuestas a la misma concentración del tóxico. Este efecto fue acompañado por un incremento del porcentaje de células en la fase S del ciclo celular en la línea pancreática. En resumen, el CPF 50 µM disminuyó la proliferación y alteró el metabolismo redox en las líneas celulares derivadas de carcinomas mamarios y melanoma. En las células PANC-1, el CPF estimuló la proliferación de las células sin modificaciones en el balance redox a las dosis estudiadas, evidenciando un mecanismo alternativo en el efecto tóxico de este compuesto que aún deberá ser elucidado.