Variabilidad de ADN mitocondrial en una poblacion de castor (Castor canadensis) en Tierra del Fuego

LIZARRALDE M.; G. DEFERRARI; S. POLJAK; C.GIUVILI

Puerto Madryn

Congreso; XIX Jornadas Argentinas de Mastozoología; 2004

SAREM

Variabilidad de ADN mitocondrial en una población aislada de castor (Castor canadensis) en Tierra del FuegoCastor canadensis) en Tierra del Fuego Marta S. Lizarralde1 2, Guillermo Deferrari1, Sebastián Poljak1 2 y Cecilia Giulivi3 1 CADIC-CONICET, CC 92, 9410 Ushuaia. 2 CIR Fac. de Medicina, UBA.1 2, Guillermo Deferrari1, Sebastián Poljak1 2 y Cecilia Giulivi3 1 CADIC-CONICET, CC 92, 9410 Ushuaia. 2 CIR Fac. de Medicina, UBA.CADIC-CONICET, CC 92, 9410 Ushuaia. 2 CIR Fac. de Medicina, UBA. 3University of Minnesota, USA. mlizarralde@cpsnet.com.arUniversity of Minnesota, USA. mlizarralde@cpsnet.com.ar Veinticinco (25) parejas de Castor canadensis fueron introducidas en 1946 en Tierra del Fuego, estableciéndose como una invasora geográficamente aislada. Dadas estas características como la introducción de un número de fundadores reducido, lo cual sugiere un máximo de 25 linajes maternos, los objetivos de su estudio son: 1- determinar las consecuencias genéticas de los cuellos de botella y el efecto fundador, 2- identificar los linajes mitocondriales presentes en la población, para correlacionarlos con las diferentes áreas invadidas y finalmente, 3-definir patrones de migración o invasión. Aquí analizamos la estructura poblacional de una muestra (n=13) de un área representativa de las de mayor nivel de invasión del ecosistema fueguino. El ADN fue extraído de muestras frescas según la técnica de SDS-Proteinasa K-fenol-RNAsa y purificado (Quiagen™). Se analizaron secuencias de ADN amplificadas por PCR con combinaciones de primers de genes mitocondriales: Citocromo b (1140 pb) y 12 SRNA (400 pb) y un fragmento (500 pb) del D-Loop. Estudios previos de FISH mostraron las secuencias teloméricas (TTAGGG) conservadas en los extremos terminales de todos los cromosomas y ninguna señal de tipo intersticial. Sin embargo, las secuencias mitocondriales alineadas utilizando Clustal W y Phylip para los dendrogramas, muestran variabilidad. En las primeras 650 pb del Citocromo b completo se detectaron 79 mutaciones de punto informativas filogenéticamente. Las transiciones de los sitios 144 y 147 discriminan a canadensis de fiber y también las inversiones del sitio 258-259 y 265-267. Entre los ejemplares de la muestra se identificaron 14% de sitios variables y 11 haplotipos de Cit. b. En el 12 SRNA se detectó un cambio (A/G) y un único haplotipo en la muestra analizada. El D-Loop, muestra cambios en las posiciones 67, 142, 156, 229, 240 y 264 y 6 haplotipos. Según nuestros datos un 25% de los linajes mitocondriales esperados se identificaron en el área geográfica analizada.Castor canadensis fueron introducidas en 1946 en Tierra del Fuego, estableciéndose como una invasora geográficamente aislada. Dadas estas características como la introducción de un número de fundadores reducido, lo cual sugiere un máximo de 25 linajes maternos, los objetivos de su estudio son: 1- determinar las consecuencias genéticas de los cuellos de botella y el efecto fundador, 2- identificar los linajes mitocondriales presentes en la población, para correlacionarlos con las diferentes áreas invadidas y finalmente, 3-definir patrones de migración o invasión. Aquí analizamos la estructura poblacional de una muestra (n=13) de un área representativa de las de mayor nivel de invasión del ecosistema fueguino. El ADN fue extraído de muestras frescas según la técnica de SDS-Proteinasa K-fenol-RNAsa y purificado (Quiagen™). Se analizaron secuencias de ADN amplificadas por PCR con combinaciones de primers de genes mitocondriales: Citocromo b (1140 pb) y 12 SRNA (400 pb) y un fragmento (500 pb) del D-Loop. Estudios previos de FISH mostraron las secuencias teloméricas (TTAGGG) conservadas en los extremos terminales de todos los cromosomas y ninguna señal de tipo intersticial. Sin embargo, las secuencias mitocondriales alineadas utilizando Clustal W y Phylip para los dendrogramas, muestran variabilidad. En las primeras 650 pb del Citocromo b completo se detectaron 79 mutaciones de punto informativas filogenéticamente. Las transiciones de los sitios 144 y 147 discriminan a canadensis de fiber y también las inversiones del sitio 258-259 y 265-267. Entre los ejemplares de la muestra se identificaron 14% de sitios variables y 11 haplotipos de Cit. b. En el 12 SRNA se detectó un cambio (A/G) y un único haplotipo en la muestra analizada. El D-Loop, muestra cambios en las posiciones 67, 142, 156, 229, 240 y 264 y 6 haplotipos. Según nuestros datos un 25% de los linajes mitocondriales esperados se identificaron en el área geográfica analizada.canadensis de fiber y también las inversiones del sitio 258-259 y 265-267. Entre los ejemplares de la muestra se identificaron 14% de sitios variables y 11 haplotipos de Cit. b. En el 12 SRNA se detectó un cambio (A/G) y un único haplotipo en la muestra analizada. El D-Loop, muestra cambios en las posiciones 67, 142, 156, 229, 240 y 264 y 6 haplotipos. Según nuestros datos un 25% de los linajes mitocondriales esperados se identificaron en el área geográfica analizada.