Analisis del daño genotoxico en el pulmon expuesto a endotoxina usando inmuno-espin trapping: mecanismos y oportunidades terapeuticas

DARIO C. RAMIREZ; SANDRA E. GOMEZ-MEJIBA

CHASCOMUS

Congreso; REUNION ANUAL DE LA SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOLOGIA; 2013

SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOLOGIA

Análisis del daño genómico en el pulmón expuesto a endotoxina usando inmuno-espin-trapping: mecanismos y oportunidades terapéuticas Ramirez, D.C. & Gomez-Mejiba, S.E. Laboratorio de Medicina Experimental & Terapéuticas IMIBIO-SL-CONICET- Universidad Nacional de San Luis, 5700 San Luis, Argentina ramirezlabimibiosl@ymail.com/ moleculargenetics.unsl@gmail.com Uno de los proyectos en curso en nuestro laboratorio está guiado por la hipótesis central que ?la radicalización del ADN es la expresión más temprana del daño oxidativo causado durante la inflamación neutrofílica ocasionada por irritantes del aire?. Para probar esta hipótesis se desarrollaron modelos bioquímicos, celulares y animales expuestos a endotoxina bacteriana (lipopolisacarido, LPS) por vía intratraqueal. La radicalización del ADN purificado o genómico en células inflamatorias/epiteliales y en el pulmón de ratones expuestos a endotoxina, fue determinada usando el espin trap 5,5-dimethyl-1-pirrolina N-oxide (DMPO) mediante la técnica de inmuno-espin trapping. La radicalización del ADN es casada por HOCl producido por MPO liberada por neutrófilos activados y captada por células epiteliales. Al atrapar radicales libres del ADN inducidos por HOCl, DMPO previno la formación de 8-oxo-dG  y la mutación del gen HPRT. Los modelos celulares también mostraron que resveratrol, un trans-estilbeno, pasa atreves de las membranas celulares y protege al ADN contra los efectos mutagénicos de HOCl producidos dentro de las células epiteliales e inflamatorias. También se observó que DMPO previno la retención/activación de neutrófilos en la microvascultura pulmonar de ratones expuestos a LPS mediante su capacidad para afectar las vías de señalamiento que activan el regulador maestro de la síntesis de moléculas de adhesión y citocinas pro-inflamatorias, el NF-kB. Se concluye que la retención de neutrófilos, HOCl intracelular y los radicales en el ADN son posibles blancos terapéuticos para evitar los efectos genotóxicos asociados a la inflamación neutrofílica, como ocurre en el pulmón expuesto a endotoxinas.