Aplicación de una nueva fitoproteasa a la síntesis enzimática de un dipéptido de interés para la industria de los alimentos

EVELINA QUIROGA; SONIA BARBERIS

San Pablo, Brasil

Workshop; III Workshop de Biocatálise e II Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2006

Instituto de Química, Universidad de Sao Pblo

El objetivo de este trabajo fue estudiar la aplicación de una nueva fitoproteasa obtenida del latex de los frutos de Araujia hortorum Fourn. (Asclepiadaceae), a la síntesis bajo control cinético de un pequeño péptido de interés comercial (N-a-CBZ-Asp-Phe.OMe), en medios bifásicos. En ambos medios bifásicos seleccionados (buffer Tris-HCl : hexano o acetato de etilo(50:50)), se obtuvo con éxito la formación del dipéptido amargo. Los mayores porcetajes de conversión en producto en hexano y en acetato de etilo fueron 11% y 13,75%, respectivamente. Debido a la hidrólisis no enzimática del grupo éster del donante de acilo (N-a -CBZ-Ala-p-nitrofenil éster), observado especialmente en acetato de etilo al 50% (v/v), se utilizó un sustrato menos activado (N-a -CBZ-Ala-OMe). Bajo tales condiciones, en ambos medios los porcentajes de conversión en producto fueron notablemente menores que cuando se usó el derivado fenilado indicando que la enzima requiere de un donante de acilo más activado. Los resultados obtenidos fueron mejorados (34,25% de conversión en producto) al aumentar 20 veces la relación [enzima] / [donante de acilo] usada, pero este aumento estuvo acompañado por una rápida hidrólisis del dipéptido. Resulta interesante destacar la elevada selectividad (para formar dipéptidos y no polimerizar) y la buena especificidad (reaccionar sólo con algunos aminoácidos) de araujiaina, resultando en consecuencia, un adecuado biocatalizador para la síntesis de pequeños péptidos biactivos.