CARACTERIZACIÓN GENÉTICA Y PARCIAL DE LIPOPEPTIDOS NO RIBOSOMALES EN Bacillus amyloliquefaciens SL-6

GARCI, PA; COZZOLINO, ME; MASCOTTI, ML; DI MASI, S; SILVA, PG

San Miguel de Tucumán

Congreso; 3ra Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2015

La síntesis de péptidos por vía no ribosomal (NRPs) enbacterias y hongos, es un sistema flexible y de rápida adaptabilidad que otorgaventajas selectivas hacia compuestos con nuevas propiedades. Diversas especiesde Bacillus producen lipopéptidos no ribosomalesque han sido estudiados con potenciales aplicaciones en el ámbito agrícola,farmacéutico y ambiental. El objetivo de este trabajo fue investigar lapresencia de los genes responsables de la síntesis de lipopéptidos en una cepanativa de San Luis, B. amyloliquefaciens SL-6, con actividad antagónica contra Botrytis cinerea, Penicillum expansum y Alternariaalternata. Los genes de la sintetasa de los NRPs fengicina(fenD), bacilomicina (bmyB), surfactina (srfA), junto al gen sfp (4-fosfopanteteínatransferasa), el cual es indispensable para dichasbiosíntesis, fueron detectados mediante Reacción en Cadena de la Polimerasa. B. amyloliquefaciens FZB42 fue usadocomo cepa control. Se analizó la expresión mediante transcripción reversa, a partir de ARNm aisladode cultivos bacterianos en Caldo Sintético Mineral. Extractosbutanólicos de sobrenadantes libre de células y esporas fueron sometidos a cromatografíaen placa (TLC) y visualizadas con iodo, agua, ninhidrina y luz UV. Los genes ysus transcriptos de ARNm de ambas cepas se confirmaron por la presencia debandas en geles de agarosa al 1%, con el peso molecular esperado. El reveladode las TLCs, permitió identificar a estos lipopeptidos por sus relaciones defrente (fengicina: 0.1, bacilomicina: 0.41 y surfactina: 0.7). La cepa nativa contienelos genes para la síntesis de estos metabolitos, que fueron secretados al mediode cultivo en las condiciones ensayadas.