Resonancia de plasmones superficiales aplicada a la detección de biomoléculas

FAMÁ, MARTÍN; PEDANO, MARIA LAURA

Mendoza

Congreso; 1er Congreso Interuniversitario I+D+i Mendoza; 2021

La resonancia de plasmones superficiales en interfaces metal-dieléctrico, SPR por Surface Plasmon Resonance, mide la modificación en la resonancia óptica producida por el cambio en el índice de refracción del medio, que ocurre como consecuencia del enlace específico de una molécula analito al sustrato. La especificidad para su uso en sensores puede lograrse modificando la superficie con elementos de bioreconocimiento que interactúen específicamente con el analito de interés. El objetivo principal de esta propuesta es aplicar este fenómeno a sistemas de sensado que permitan resolver problemas de la sociedad actual. El Mal de Chagas es una enfermedad endémica en más de 21 países del continente americano. Es causada por el parásito Tripanosoma Cruzi, el cuál es transmitido a los humanos mediante la picadura de Triatoma Infestans, cotidianamente conocido como vinchuca. El objetivo a largo plazo de este trabajo es la detección del Mal de Chagas. La enzima Tripanotión Reductasa se hace presente en el flujo sanguíneo de un paciente infectado, reconoce específicamente al péptido Tripanotión Oxidado, y es la enzima que se buscará detectar. Debido al alto costo de los péptidos y enzimas purificados para los ensayos de prueba, y al riesgo de trabajar con muestras de sangre infectada, se propuso como objetivo a corto plazo (el que se abarca en este trabajo) desarrollar un sistema para detectar biomoléculas que sean análogas. Se llevaron a cabo pruebas utilizando la enzima Glutatión Reductasa (GlR), que se asemeja a la Tripanotion Reductasa. La misma reconoce específicamente al péptido Glutatión Oxidado (GlOx). Se estudió el efecto de modificar películas delgadas de oro con distintas moléculas de anclaje (tioles y/o polímeros) y GlOx como sonda, para el desarrollo de un biosensor para detectar la enzima Glutatión Reductasa, importante también en los sistemas metabólicos del organismo humano. En esta etapa, se estudió la mejor forma de inmovilizar las biomoléculas de reconocimiento en la superficie, de modo de optimizar razonadamente las condiciones experimentales y obtener la mejor afinidad de interacción posible para lograr una mejor sensibilidad en los parámetros analíticos de la metodología de detección. La superficie funcionalizada se caracterizó mediante la técnica de SPR y espectroscopía Raman aumentada por superficie.