Validación de un método inmunoenzimático ELISA indirecto para detección de anticuerpos contra la poliproteína 3ABC del virus de la Fiebre Aftosa (FA)

DE CONTI, E.; PEREZ VISÑUK, M; MADDONI, G; PEDEMONTE, A; MARADEI E; BERGMANN I.E.; MALIRAT V

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Jornada; IX Jornada de Jóvenes Investigadores. Facultad de Ciencias Veterinarias ? UBA; 2019

Facultad de Ciencias Veterinarias - UBA

La FA, enfermedad de notificación obligatoria ante la Organización Mundial de SanidadAnimal (OIE), afecta a animales biungulados y genera grandes pérdidas económicas en lospaíses afectados. La misma es causada por el virus de la FA (VFA), y en fasesubclínica/aguda presenta una alta tasa de contagio y rápida difusión. Una característicaimportante es la capacidad de establecer infección persistente, inclusive en animalesvacunados, cuya relevancia epidemiológica aún es controvertida. Argentina es reconocidainternacionalmente por la OIE como libre de FA sin/con vacunación. El mantenimiento delstatus de este último requiere de muestreos serológicos que demuestren fehacientemente laausencia de actividad viral, independientemente del estado de vacunación y/o serotipoinvolucrado, mediante pruebas basadas en la detección de anticuerpos contra proteínas nocapsidales (PNC) del VFA. En este trabajo se describe la validación de un testinmunoenzimático ELISA indirecto que detecta anticuerpos contra la PNC 3ABC siguiendolas 4 etapas recomendadas por la OIE. La fase 1 de validación incluyó la sensibilidad analít icaevaluada con sueros de animales infectados. La sensibilidad diagnóstica (DSe), (fase 2), seevaluó con sueros verdaderos positivos de animales infectados experimentalmente/campo,con/sin vacunación previa, alcanzando un valor de 99,4% o de 100%, cuando se incluyeronsueros de categoría sospechoso; para la especificidad diagnóstica se emplearon sueros deanimales vírgenes alcanzando un valor de 98,1% y 98,2% en animales negativos vacunados.La repetibilidad (fase 3) se evaluó a partir de 3 sueros de diferente grado de reactividad en32 pruebas independientes con resultados satisfactorios inclusive cuando se evaluaronmuestras débilmente positivas, siendo los coeficientes de variación intra/inter-ensayomenores a 10% y 20%, respectivamente. Asimismo, la reproducibilidad evaluadapreliminarmente en un laboratorio adicional resultó satisfactoria. Al aplicarse el test sobresueros de muestreo del programa de vigilancia seroepidemiológica (fase 4), la distribuciónde frecuencias y perfiles de reactividad resultaron dentro de valores esperados: 97,1%negativos, 0,8% sospechosos, 2,1% positivos. Al comparar con un panel de referenciainternacional, se obtuvieron resultados satisfactorios particularmente de DSe, mostrando suviabilidad para incluir dicho test como prueba de referencia. Se concluye que el mismocumplió positivamente con las 4 etapas, logrando resultados de sensibilidad, especificidad,repetibilidad y reproducibilidad apropiados, estableciendo su potencial para ser consideradocomo prueba de referencia en estudios de ausencia de circulación viral de FA,independientemente del estado de vacunación.