Enfoques para validación de técnicas inmunoenzimáticas para detección de anticuerpos

DE CONTI, E.; MALIRAT V.;; BERGMANN I.E.

Buenos Aires

Jornada; Terceras Jornadas de Jóvenes Investigadores de la Facultad de Veterinaria, UBA,; 2013

Facultad de Veterinaria, UBA

INTRODUCCIÓN El virus de la fiebre aftosa (VFA), del género Aftovirus dentro de la familia Picornaviridae , es un virus de genoma RNA que afecta animales biungulados, impactando en forma negativa a la ganadería. Una propiedad relevante de este virus es la de establecer infecciones subclínicas/persistentes, inclusive en animales que han sido previamente vacunados. Por ese motivo, países como la Argentina, con gran actividad agropecuaria, han establecido fuertes programas de erradicación y control de la enfermedad. En la actualidad nuestro país posee el estatus otorgado por la OIE de libre de la enfermedad, sin vacunación en territorios al sur del paralelo 42 y con aplicación de la vacunación al norte de ese paralelo. Para el mantenimiento de ese estatus, adicionalmente a las actividades de control que se llevan a cabo en el país, es necesario demostrar en forma fehaciente la ausencia de circulación viral por metodologías laboratoriales altamente sensibles y específicas. La estrategia utilizada para alcanzar estos parámetros se basa en la detección de anticuerpos contra las proteínas no capsidales del virus (que actúan durante la replicación del mismo). Si bien en los últimos años se han desarrollado metodologías para alcanzar esta estrategia, en la actualidad no se cuenta con antígenos recombinantes con características que permitan la aplicación de estas pruebas en gran escala, con garantía de calidad exigida por los mercados internacionales. En este contexto, es esencial la obtención de nuevas sondas serológicas con características que permitan el desarrollo y validación de métodos con el desempeño requerido y capaces de ser utilizadas en la producción en gran escalas de kits con garantía de calidad OBJETIVO El trabajo que se presenta tuvo como objetivo la producción y purificación de antígenos recombinantes correspondientes a las poliproteínas y proteínas no capsidales de VFA: 3ABC, 3AB, 3A, 2C, y 3D (que actúan en su replicación) en cantidad y calidad necesarias para el desarrollo y validación de métodos inmunoenzimáticos de alta sensibilidad y alta especificidad , capaces de identificar animales infectados con el VFA , independientemente de su estado de vacunación.