Modificación biocatalítica de esteroides: oxidación de Baeyer-Villiger selectiva sobre el anillo D

MASCOTTI ML; BISOGNO FR; LAPADULA WJ; JURI AYUB M; KURINA-SANZ M

Congreso; V Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2012

La capacidad de los hongos filamentosos para transformar esteroides de la serie C19 ha sido ampliamente estudiada [1,2]. En la búsqueda de nuevas cepas con actividad BV monooxigenasa (BVMO) se abordó el estudio de la biotransformación de dehidro-epi-androsteona (DHEA), cortisona y otros esteroides empleando como biocatalizador Aspergillus parasiticus. La especie fue seleccionada por su capacidad de producir aflatoxinas, en cuya biosíntesis se postula que estarían involucradas BVMOs y, debido a que en trabajos previos hemos verificado su capacidad de oxidar estereoselectivamente el sustrato modelo biciclo [3.2.0] hept-2-en-6-ona y distintos sulfuros proquirales [3]. Los perfiles de biotransformación obtenidos bajo diferentes condiciones de trabajo se analizaron mediante GC-MS y, posteriormente, los productos purificados se caracterizaron por H-13 y C- RMN. Se evidenció que A. parasiticus es capaz de producir como producto mayoritario la lactona normal derivada de DHEA y otros metabolitos minoritarios (figura 1). Este resultado evidencia la capacidad de este microrganismo de llevar a cabo la reacción de BV. La biotransformación se llevó a cabo también a escala semipreparativa con muy buenos resultados, demostrando así la robustez del proceso. Posteriormente, mediante la búsqueda en bases de datos genómicas y de ESTs (Expressed Sequence Tags), se halló una secuencia con alta similitud con otras BVMOs, la cual podría ser la responsable de la actividad observada. El alineamiento de múltiples secuencias y análisis de inferencias filogenéticas apoyan esta hipótesis. Actualmente, se encuentra en progreso el clonado y la expresión de dicha BVMO para realizar su caracterización como biocatalizador.