Estudio de la reación enzimática entre α-quimiotripsina y β-naftilacetato en medio homogéneo y en micelas inversas de AOT

M.A. BIASUTTI; M. D. FUNES; R. D. FALCONE; M. N. CORREA; J. J. SILVER.; E. LISSI; E. ABUIN

Bahía Blanca

Congreso; XII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Orgánica; 2003

AAIFQ

ESTUDIO DE LA REACCIÓN ENZIMÁTICA ETRE α-QUIMIOTRIPSINA Y β- NAFTILACETATO EN MEDIO HOMOGÉNEO Y EN MICELAS INVERSAS DE AOT M.A. Biasutti, Matías D. Funes, Rubén D. Falcone, Mariano N. Correa, J. J. Silver, E. Lissi, E. Abuin Departamento de Química, Universidad Nacional de Río Cuarto, Agencia Postal Nro 3, X5804BYA Río Cuarto, Córdoba, Argentina. E-mail: rfalcone@exa.unrc.edu.ar   Se realizo un estudio comparativo de las influencia del medio micelar sobre la reacción enzimática de α ? quimitripsina con β ? naftil acetato como sustrato de dicha enzima. Se investigó, en primer término, la cinética enzimática en medio homogéneo. Dicha cinética se siguió por espectroscopia UV ? Visible a λ = 330 nm, donde se produce la aparición de la banda correspondiente al  β ? naftol, que es uno de productos formados en dicha reacción. Las velocidades iniciales  (V0) se obtuvieron siguiendo la absorbancia a 330 nm en función del tiempo. Con estos valores, es posible determinar los parámetros cinéticos tales como constate de catálisis; Kcat y la constante de Michaelis ? Menten, KM  partir de los gráficos de [enzima]/ V0 en función de 1/[sustrato]. Por otro lado, se estudió la citada reacción enzimática en micelas inversas con corazón polar por glicerol + agua. Las condiciones óptimas que permiten la solubilización y actividad de la enzima como asimismo la estabilidad de la microemulsión, se obtuvieron en mezclas Gly: H2O al 38% y Ws (= [Gly + H2O]/ [AOT]) del orden de 13-15. Se determinaron los parámetro cinéticos a diferentes  [AOT] y a diferentes valores de Ws. Dichos parámetros cinéticos son comparados con los obtenidos en medio homogéneo, a los fines de determinar la influencia de la micela inversa sobre la reacción enzimática. Asimismo dichas experiencias permiten calcular las constantes de partición de reacción enzimática. Asimismo dichas experiencias permiten calcular las constantes de partición de  β ? naftil acetato y β ? naftol.