BECAS
CHELALICHE Anibal Sebastian
congresos y reuniones científicas
Título:
RESPUESTA TRANSCRIPCIONAL DE PLEUROTUS PULMONARIUS LBM105 DURANTE LA DEGRADACIÓN DE BIFENILOS POLICLORADOS
Autor/es:
CHELALICHE ANIBAL SEBASTIAN; ALVAREGNA ADRIANA ELIZABET; ZAPATA DARIO PEDRO; FONSECA MARÍA ISABEL
Lugar:
Posadas
Reunión:
Jornada; 1ras JORNADAS INSTITUCIONALES INBIOMIS 10 años Construyendo Biotecnología; 2022
Institución organizadora:
Instituto de Biotecnología Misiones
Resumen:
Los bifenilos policlorados, también conocidos como PCBs, son compuestosquímicos sintéticos compuestos de una molécula de bifenilo conteniendo de 1 a 10sustituciones de cloro. Si bien, a mediados de los años 70 su producción ha sidoprohibida a nivel mundial la contaminación ambiental producto de su distribucióntodavía persiste. Debido a su baja biodegradabilidad y alta lipofilia, estoscompuestos son propensos a bioacumularse en los tejidos, derivando en unabiomagnificación de la cadena alimenticia, posicionándose en la lista de prioridad decompuestos peligrosos propuesta por la Agencia de Protección Ambiental deEstados Unidos. Entre los diferentes organismos con capacidad de tolerar y removerestos compuestos recalcitrantes, los hongos de pudrición blanca han demostradouna capacidad de alcanzar altas tasas de remoción debido a su capacidad deproducir un arreglo de potentes enzimas oxidativas caracterizadas por una bajaespecificidad al sustrato. Dentro de este grupo de organismos, la cepa Pleurotuspulmonarius LBM 105 ha demostrado que es capaz de alcanzar altos porcentajes dedegradación en medio líquido. Si bien su capacidad de degradación ha sidoestudiada en profundidad, los mecanismos de respuesta y las vías metabólicasimplicadas en la degradación aún faltan por ser dilucidadas. Es por ello que seplantea en este trabajo un estudio de la respuesta transcripcional de la cepa P.pulmonarius LBM 105 en presencia de los PCBs, buscando encontrar genesexpresados diferencialmente que permitan dilucidar los mecanismos molecularesllevados a cabo en las células fúngicas durante la degradación de loscontaminantes. Para ello, se desarrolló la cepa LBM 105 en un medio mínimo deglucosa-asparagina por 21 días en presencia y ausencia de una mezcla compleja dePCBs, comparando con el control en ausencia del mismo. Luego, el micelio fuecosechado y disgregado con nitrógeno líquido para obtener el ARN, seguido de unprotocolo de purificación con Fenol:Cloroformo. El ARN fue secuenciado en unaplataforma Novaseq-PE150 (Illumina). El transcriptoma luego fue ensambladoutilizando el programa Geneious V 8.1 utilizando la referencia GCA_012979565.1. Elanálisis de expresión diferencial fue realizado en un entorno de R utilizando elprograma EdgeR. A partir de este estudio se observó una gran inducción delmetabolismo oxidativo con enzimas como las citocromo P450, reductasas decadena corta, aldo/ceto reductasas, lacasas y peroxidasas viéndosesobrerrepresentadas en presencia del contaminante. Así también, enzimas con un rol activo en el metabolismo de los xenobióticos como ser las dienelactonhidrolasas y glutatión-S-transferasa fueron sobreexpresadas. Esto indica no solo lainducción de una serie de enzimas involucradas en la transformación decontaminantes, sino de un aumento del estrés oxidativo debido a las cantidades deespecies reactivas del oxígeno que se producen dada la acción de estas enzimas. Elentendimiento del rol de estas proteínas permitiría el desarrollo de futurasestrategias de biorremediación optimizadas para el uso de estas enzimas para laremoción de matrices contaminadas con PCBs.