Inhibición de la formación de biofilm en cepas de Klebsiella con L fermentum. Estudios in vitro e in vivo

CLARA SILVA DE RUIZ,; NATALIA C MALDONADO; MARIA ELENA FÁTIMA NADER

Cordoba, Agentina

Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiologia; 2007

Asociación Argentina de Microbiologia

Inhibición de la formación de biofilm en cepas de Klebsiella con L fermentum. Estudios in vitro e in vivo Silva, C (1); Maldonado, N (2); Nader-Macías, F. (2) (1)Cátedra de Bacteriología. Fac. Bioqca, Qca y Fcia. UNT. Ayacucho 491.(2) CERELA. Chacabuco 145. San Miguel de Tucumán. e-mail: microbiologia.clinica@unt.edu.ar Las infecciones urinarias asociadas a catéteres son un verdadero desafío para la prevención y el tratamiento. Los microorganismos involucrados, entre ellos Klebsiella, desarrollan diversos mecanismos de virulencia como la formación de biopelículas. La erradicación es muy difícil por la alta resistencia a los antimicrobianos. Numerosas investigaciones indagan en terapias alternativas tanto preventivas como terapéuticas entre otras la bacterioterapia, por ello nuestro objetivo fue inhibir el desarrollo de biofilm en cepas de Klebsiella aisladas de catéteres urinarios con células y sobrenadante de L fermentum CRL 1058 mediante estudios in vivo e in vitro. Estudio in vitro: En una policubeta se colocó  150 y 100 ml  de la enterobacteria completando volumen de 200 ml con células de lactobacilos o sobrenadante ácido y neutro, se incubó a 37ªC por 4 hs. Luego de los lavados se efectuaron lecturas de la densidad óptica (DO) (O´ Toole) y los recuentos bacterianos  en cada  experiencia.  100ml de  lactobacilos o sobrenadante inhiben totalmente la formación de biofilm y disminuye entre 3 y 7 log el crecimiento. 50ml de lactobacilos o sobrenadante disminuyen de 5 a 11 veces las lecturas de DO  y el crecimiento entre 3 y 7 log  . Estudios in vivo preventivo: Se inoculó intrauretralmente en ratones hembra Balb/c adultas tres dosis de perlas de agarosa con 3x 108 ufc L. fermentum  y 1 dosis de suspensión de K. pneumoniae de 109ufc/ml 12 hs después. Se realizaron cultivos de homogenatos de uretra, vejiga, uréteres y riñones a los 3, 5, 7 y 10 días pos-inoculación. Estudios in vivo terapéuticos: por inoculación intrauretral de 1 dosis de  K. pneumoniae de 109ufc/ml y 12 hs después 3 dosis de 3x 108 ufc L. fermentum. Se realizaron cultivos microbianos de homogenatos de órganos del tracto urinario a los 3, 5, 7 y 10 días pos-inoculación. Se observó disminución en el número de patógenos pero  no se produjo la erradicación total del mismo tanto en los ensayos preventivos como terapéuticos.