Modulación de la respuesta inflamatoria por Lactobacillus casei en un modelo experimental de neumonía

CECILIA HARO; JULIO VILLENA; SILVIA RACEDO; GRACIELA AGÜERO; SUSANA ALVAREZ

Tafí del Valle, Tucumán, Argentina

Jornada; XXII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2005

Asociación de Biología de Tucumán

Lactobacillus casei (Lc) ejerce una actividad inmunomoduladora benéfica en el proceso inflamación-coagulación. Nuestro objetivo fue evaluar el efecto de Lc sobre la respuesta inflamatoria inducida por Streptococcus pneumoniae (Sp), en un modelo de injuria pulmonar en ratones desnutridos. Ratones Albino Suizos desnutridos al destete (D) con una dieta hipoproteica, recibieron durante 7d alimento balanceado (AB) ó AB suplementado con L.c  durante 2d consecutivos (AB+Lc). Finalizado el período de renutrición, estos animales, D y controles normales (N) fueron infectados por vía intranasal con Sp (103 UFC/ratón). Se tomaron muestras antes del desafío (d0) y en los d 1,5 y 10 postinfección (dpi), para realizar las siguientes determinaciones: a) Actividad de lactato deshidrogenasa (LDH) para evaluar el daño celular local y concentración de albúmina (Alb) como medida de la permeabilidad, dosadas en fluido broncoalveolar (BAL). b) Concentración de IL-1 y TNF-a (proinflamatorias) e IL-10 (reguladora) en BAL por ELISA. c) Estudio histopatológico de tejido pulmonar. d) Concentración fibrinógeno. f) Depósitos de fibrinógeno en pulmón empleando una técnica inmunohistoquímica. Resultados: Los niveles de Alb y LDH en BAL estuvieron aumentados durante la infección en todos los grupos experimentales, con valores superiores en los D. El grupo AB+Lc mostró valores de Alb inferiores a los de los N (p<0,05) a los 5 y 10dpi (Alb: N5dpi=0,53±0,09; AB+Lc5dpi=0,39±0,08 mg/dl). El estudio histopatológico reveló un importante daño en los pulmones de los D, con reducción de los espacios aéreos, intensa respuesta inflamatoria, fibrosis y hemorragia. En los N el daño tisular fue menos severo. La renutrición con AB+Lc disminuyó significativamente la injuria pulmonar, mostrando una histología similar a los N. Después del desafío, TNF-a e IL-1 en BAL se incrementaron alcanzando un pico a las 12 hpi, con valores significativamente menores que los D (p<0,05) (IL-1:N12hpi=269±15 ; D12hpi=134±13 pg/ml). Ambas dietas de renutrición indujeron aumento de TNF-a e IL-1, pero sólo AB+Lc alcanzó los valores del N (IL-1 AB12hpi=203±15 ; AB+Lc12hpi=267±14 pg/ml). La IL-10 se incrementó en todos los grupos luego del desafío, siendo los valores de los N mayores que los D. En el grupo AB+Lc, la IL-10 en BAL fue superior al N durante todo el período estudiado (N1dpi=368±23; D1dpi=299±19 AB+Lc1dpi=431±23 pg/ml). Los valores de fibrinógeno estuvieron aumentados durante la infección en todos los grupos, siendo los niveles de los D significativamente menores que los N. Ambas dietas de renutrición incrementaron este parámetro, observándose valores mayores en el grupo AB+Lc (N1dpi=238,7±4,5; D1dpi=146,5±3,9; AB1dpi=229,6±1,9; AB+Lc1dpi=310,3±3,6 mg/dl). El grupo D evidenció un incremento progresivo de los depósitos de fibrinógeno en pulmón que culminó involucrando la totalidad del parénquima (patrón difuso) a los 10 dpi. En los N la reacción fue intensa a nivel de la pleura observándose depósitos ligeramente positivos en algunas zonas del parénquima (patrón focal). Los animales renutridos con AB mostraron un comportamiento similar al N, mientras que la renutrición con AB+Lc permitió que la reacción se limite a la zona pleural sin alterar al parénquima pulmonar. Conclusión: la adición de L. casei a la dieta de renutrición modula favorablemente la respuesta inflamatoria a la infección, limitando el daño causado por la misma.