Evaluación de la administración preventiva de bacterias lácticas en un modelo de infección por Streptococcus pneumoniae, para su potencial uso como vectores de vacunas

JULIO VILLENA; MARCELA MEDINA; SUSANA ALVAREZ

Tafí del Valle, Tucumán, Argentina

Jornada; XXII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2005

Asociación de Biología de Tucumán

Los efectos inmunomoduladores de las bacterias lácticas (BL) están ampliamente documentados y la mayoría de los estudios se han focalizado en la evaluación del efecto protectivo sobre patógenos intestinales. Sin embargo, teniendo en cuenta el concepto de sistema inmune común de mucosas, en los últimos años se ha considerado la posibilidad de emplear BL para incrementar la inmunidad en sitios mucosos distantes tales como el tracto respiratorio. Los avances en biotecnología e inmunología han hecho posible el diseño de una nueva generación de vacunas empleando microorganismos recombinantes como vehículo de antígenos. Las BL, reconocidas como GRAS (Generally Regarded As Safe), representan un vehículo adecuado para la expresión de antígenos heterólogos. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto adyuvante “per se” de dos cepas de BL: Lactobacillus plantarum 37A y Lactococcus lactis NZ9000 de probada capacidad transformante, en la prevención de una infección respiratoria por S. pneumoniae. Para ello, a ratones albino-suizos, de 6-8 semanas de edad, se les administró diferentes dosis (107,108 o 109 células/ratón/día) de L. plantarum 37A o L. lactis NZ9000 en el agua de bebida en distintos períodos de tiempo (2, 5 o 7 días consecutivos). Al final de cada período, estos grupos y los controles sin tratar (C) fueron infectados por vía intranasal con el patógeno (106 UFC/ratón) y durante 15 días post-infección (dpi) se realizaron las siguientes determinaciones: a) Cultivos de pulmón  b) Hemocultivos para determinar la diseminación del patógeno, c) Recuento total y diferencial de leucocitos en sangre y en lavado broncoalveolar (BAL), d) Hematocrito (Hto) e) Hemoglobina (Hb). Resultados: Sólo el grupo que recibió L. lactis durante 5 días en dosis 108 (LL5d108) presentó valores significativamente menores al grupo C en los recuentos del patógeno en pulmón (15dpi: C=5,61±0,23 UFC/g de pulmón; LL5d108=3,03±0,13). LL5d108 resultó efectiva para limitar el pasaje del patógeno a sangre, ya que los hemocultivos se negativizaron a los 10 dpi. L. plantarum 37A no logró reducir el recuento de neumococos en pulmón en ninguno de los grupos experimentales evaluados. Los valores de Hto y Hb de ratones control de bioterio son 45,8±0,3% y 14,9±0,5g/dl respectivamente, estos se mantuvieron inalterados luego del desafío con el patógeno en todos los grupos experimentales. La infección con S. pneumoniae indujo un importante incremento de leucocitos con predominio de neutrófilos en sangre y BAL en todos los grupos estudiados, sin embargo, el grupo LL5d108, mostró valores de neutrófilos en sangre y en BAL significativamente mayores a los controles (5dpi: Neutrófilos sangre: C= 2,1±0,08 109cél/L; LL5d108= 2,8±0,02; Neutrófilos BAL: C=18,0±0,6 cél/ml; LL5d108= 21,5±0,7). Conclusiones: la administración preventiva de L. lactis durante 5 días en dosis 108 fue capaz de disminuir la colonización pulmonar y limitar la diseminación del patógeno. Este efecto estaría mediado por el incremento observado en el reclutamiento de neutrófilos al sitio de la infección. L. plantarum no logró mejorar la respuesta a la infección en ninguna de las dosis ensayadas. La capacidad transformante de L. lactis sumada a su efecto inmunomodulador frente a una infección por neumococo, hacen de ésta bacteria un muy buen candidato a ser usado como vector  de vacunas anti-neumocócicas.