Aplicación de un cultivo mixto de cepas fúngicas autóctonas en la biotransformación de Cr (VI)

CASTRO M. F; CRISTIAN BAZÁN; VILLEGAS, L. B.

Rosario Santa Fe

Congreso; XIV Congreso Argentino de Microbiologia; 2016

Asociación Argentina de Microbiologia

Los microorganismos se encuentran en la naturaleza conviviendo en consorcios para beneficio mutuo. Por esto, la utilización de cultivos mixtos en procesos de biorremediación de metales pesados surge como una alternativa al uso de cultivos puros. El objetivo de este trabajo fue evaluar tolerancia y capacidad de  remoción de cromo de un cultivo mixto de  tres cepas  fúngicas aisladas de  sedimentos del Río Chorrillos, San Luis: Candida sp., Trichoderma sp. y Wickerhamomyces sp. resistentes a Cr(VI). Se determinó la concentración inhibitoria mínima  (CIM) del cultivo mixto,  en  10  ml  de  medio  líquido  EG  (g  L‐1:  glucosa,  10;  K2HPO4,  0,125;  KH2PO4,  0,125;  MgSO4,  0,1  y  extracto  de  levadura,  1),  con concentraciones crecientes de Cr(VI) (250‐1200 mg L‐1) y un control biótico sin cromo (CB). Se incubaron 106 células o esporos de cada cepa, a 30°C y 200 rpm durante 120h y se determinó la viabilidad de los cultivos utilizando resazurina (reactivo redox). La CIM se definió como la menor concentración de Cr(VI) con la que no se observó reducción de la resazurina. Se evaluó crecimiento y remoción de Cr(VI) en 50 ml de medio líquido EG suplementado con Cr(VI) (25‐100 mg L‐1) y en un CB, en idénticas condiciones. Se inoculó 106 células o esporos ml‐1 (concentración final)  de  levaduras  u  hongo  filamentoso,  respectivamente.  El  crecimiento  se  evaluó  por  peso  seco,  la  remoción  de  Cr(VI)  por  el  método colorimétrico de la 1,5‐Difenilcarbazida cada 24h y  cromo total en sobrenadantes y en la biomasa por espectrometría de emisión óptica (BAIRD‐ICP 2070). Los ensayos se realizaron por triplicado. Al final de la incubación se confirmó la presencia de los microorganismos por observaciones microscópicas y reconocimiento en placa. La CIM para el cultivo mixto fue de 550 mg L‐1de Cr(VI), intermedio a los obtenidos con Candida sp. (1500 mg L‐1), Wickerhamomyces sp.(250 mg L‐1) y Trichoderma sp. (1000 mg L‐1) en cultivos puros. El crecimiento del cultivo mixto en presencia del  metal  disminuyó  en  un  40‐50%  respecto  al  CB.  La  remoción  de  Cr(VI)  con  25  y  50  mg  L‐1  de  Cr(VI)  fue  de  90%±0,07  y  80%±0,27 respectivamente, superiores a los obtenidos en cultivos puros; mientras que con 75 y 100 mg L‐1 de Cr(VI) se alcanzó un 50%±1,7 y 33%± 1,1 respectivamente,  levemente  inferiores  a  los  cultivos  puros.  Cabe  destacar  que  los  valores  mas  altos  de  remoción  se  alcanzaron  a  tiempos menores en relación a los cultivos puros. La remoción de cromo total fue solo de un 7 a 8 % independientemente de la concentración de cromo en el medio. Al verificar el cultivo mixto a las 120 h, se observó que el Cr(VI) inhibió el crecimiento de Trichoderma sp., por lo que la remoción de  cromo  fue  realizada  por  las  levaduras.  Este  cultivo  mixto  mostró  resultados  interesantes  y  se  espera  mejorar  la  remoción  de  Cr(VI) optimizando  el  medio  de  cultivo  y  las  condiciones  de  crecimiento,  como  también  evaluar  metabolitos  de  cooperación  presentes  entre  las levaduras y causantes de la inhibición del hongo filamentoso.